Solid Phase Extraction: Pagbulag mao ang Pundasyon niini nga Pagpangandam!

Ang SPE naglungtad na sulod sa mga dekada, ug alang sa maayong rason. Kung gusto sa mga siyentista nga tangtangon ang mga sangkap sa background gikan sa ilang mga sample, nag-atubang sila sa hagit sa pagbuhat niini nga wala’y pagkunhod sa ilang abilidad sa tukma ug tukma nga pagtino sa presensya ug kadaghan sa ilang compound nga interes. Ang SPE maoy usa ka teknik nga sagad gigamit sa mga siyentista aron makatabang sa pag-andam sa ilang mga sample para sa sensitibong instrumentasyon nga gigamit para sa quantitative analysis. Ang SPE lig-on, nagtrabaho alang sa usa ka halapad nga han-ay sa mga tipo sa sampol, ug ang mga bag-ong produkto ug pamaagi sa SPE padayon nga gipalambo. Sa kasingkasing sa pagpalambo sa mga pamaagi mao ang usa ka pagpasalamat nga bisan pa ang pulong nga "chromatography" wala makita sa ngalan sa teknik, SPE bisan pa niana usa ka matang sa chromatographic separation.

WX20200506-174443

SPE: Ang Hilum nga Chromatography

Adunay usa ka karaan nga panultihon nga "kon ang usa ka kahoy mahulog sa usa ka lasang, ug walay usa nga makadungog niini, motingog pa ba kini?" Kana nga panultihon nagpahinumdom kanato sa SPE. Morag katingad-an kana nga isulti, apan kung maghunahuna kita sa SPE, ang pangutana mahimong "kung mahitabo ang panagbulag ug wala’y detector didto nga magrekord niini, nahitabo ba gyud ang chromatography?" Sa kaso sa SPE, ang tubag usa ka lanog nga "oo!" Kung nag-develop o nag-troubleshoot sa usa ka pamaagi sa SPE, makatabang kaayo ang paghinumdom nga ang SPE usa ra ka chromatography nga wala ang chromatogram. Kung hunahunaon nimo kini, dili ba si Mikhail Tsvet, nga nailhan nga "amahan sa chromatography," naghimo sa gitawag naton nga "SPE" karon? Sa dihang iyang gibulag ang iyang mga sinagol nga mga pigment sa tanom pinaagi sa pagtugot sa grabidad nga magdala niini, nga matunaw sa usa ka solvent, pinaagi sa usa ka higdaanan sa ground up nga chalk, lahi ba kini sa modernong pamaagi sa SPE?

Pagsabot sa Imong Sampol

Tungod kay ang SPE gibase sa mga prinsipyo sa chromatographic, sa kasingkasing sa matag maayong pamaagi sa SPE mao ang relasyon tali sa mga analytes, ang matrix, ang stasionary phase (ang SPE sorbent), ug ang mobile phase (ang mga solvent nga gigamit sa paghugas o elute sa sample) .

Ang pagsabut sa kinaiyahan sa imong sample kutob sa mahimo mao ang labing kaayo nga lugar nga magsugod kung kinahanglan nimo nga pauswagon o sulbaron ang usa ka pamaagi sa SPE. Aron malikayan ang wala kinahanglana nga pagsulay ug sayup sa panahon sa pagpalambo sa pamaagi, ang mga paghulagway sa pisikal ug kemikal nga mga kabtangan sa imong mga analytes ug ang matrix makatabang kaayo. Kung nahibal-an nimo ang bahin sa imong sample, naa ka sa usa ka mas maayo nga posisyon aron ipares ang sample sa usa ka angay nga produkto sa SPE. Pananglitan, ang pagkahibalo sa relatibong polarity sa mga analyte kon itandi sa usag usa ug ang matrix makatabang nimo sa pagdesisyon kung ang paggamit sa polarity sa pagbulag sa mga analyte gikan sa matrix mao ang husto nga pamaagi. Ang pagkahibalo kung neyutral ba ang imong mga analyte o mahimo’g maglungtad sa mga estado nga adunay bayad makatabang usab nga idirekta ka sa mga produkto sa SPE nga espesyalista sa pagpabilin o pag-alis sa mga neyutral, positibo nga gikargahan, o negatibo nga gikargahan nga mga espisye. Kini nga duha ka mga konsepto nagrepresentar sa duha sa labing kasagarang gigamit nga analyte nga mga kabtangan aron magamit sa paghimo sa mga pamaagi sa SPE ug pagpili sa mga produkto sa SPE. Kung mahimo nimong ihulagway ang imong mga analyte ug ang mga prominenteng sangkap sa matrix niini nga mga termino, padulong ka sa pagpili sa usa ka maayong direksyon alang sa imong pagpauswag sa pamaagi sa SPE.

WX20200506-174443

Pagbulag pinaagi sa Affinity

Ang mga prinsipyo nga naghubit sa mga panagbulag nga mahitabo sulod sa usa ka kolum sa LC, pananglitan, anaa sa dula sa usa ka pagbulag sa SPE. Ang pundasyon sa bisan unsang chromatographic separation mao ang pag-establisar og sistema nga adunay lain-laing ang-ang sa interaksyon tali sa mga sangkap sa sample ug sa duha ka hugna nga anaa sa column o SPE cartridge, ang mobile phase ug ang stationary nga hugna.

Usa sa unang mga lakang padulong sa pagbati nga komportable sa pagpauswag sa pamaagi sa SPE mao ang pagkapamilyar sa duha ka kasagarang nasugatan nga mga matang sa interaksyon nga gigamit sa SPE separation: polarity ug/o charge state.

Polarity

Kung gamiton nimo ang polarity aron limpyohan ang imong sample, usa sa una nga mga pagpili nga kinahanglan nimong buhaton mao ang pagdesisyon kung unsa ang "mode" ang labing kaayo. Labing maayo nga magtrabaho uban ang medyo polar nga SPE medium ug medyo nonpolar nga mobile phase (ie normal nga mode) o ang kaatbang, usa ka medyo nonpolar nga SPE medium inubanan sa medyo polar nga mobile phase (ie reversed mode, gitawag nga ingon tungod kay kini ang kaatbang. sa una nga natukod nga "normal mode").

Sa imong pagsuhid sa mga produkto sa SPE, imong makita nga ang mga hugna sa SPE anaa sa usa ka lain-laing mga polaridad. Dugang pa, ang pagpili sa mobile phase solvent nagtanyag usab usa ka halapad nga mga polaridad, kasagaran kaayo nga tunable pinaagi sa paggamit sa mga pagsagol sa mga solvent, buffer, o uban pang mga additives. Adunay usa ka dako nga lebel sa pagkamaayo nga posible kung gamiton ang mga kalainan sa polarity ingon nga panguna nga kinaiya nga pahimuslan aron mabulag ang imong mga analyte gikan sa mga interbensyon sa matrix (o gikan sa usag usa).

Hinumdomi lang ang karaang panultihon sa chemistry nga "sama sa matunaw sama sa" kung imong gikonsiderar ang polarity isip drayber sa panagbulag. Ang labi ka parehas nga compound sa polarity sa usa ka mobile o stationary nga hugna, mas lagmit nga kini makig-interact nga mas kusgan. Ang mas lig-on nga mga interaksyon sa naghunong nga hugna mosangpot sa mas taas nga pagpabilin sa SPE medium. Ang lig-on nga interaksyon sa mobile phase mosangpot sa dili kaayo retensyon ug mas sayo nga elution.

Estado sa Pagbayad

Kung ang mga analyte sa interes mahimong kanunay nga anaa sa usa ka charged state o mahimo nga ibutang sa usa ka charged state pinaagi sa mga kondisyon sa solusyon nga ilang natunaw (eg pH), unya laing gamhanan nga paagi sa pagbulag kanila gikan sa matrix (o matag usa. uban pa) pinaagi sa paggamit sa SPE media nga makadani kanila nga adunay bayad sa ilang kaugalingon.

Sa kini nga kaso, ang klasiko nga mga lagda sa pagdani sa electrostatic magamit. Dili sama sa mga panagbulag nga nagsalig sa polarity nga mga kinaiya ug ang "sama sa dissolves sama" nga modelo sa mga interaksyon, ang gisakyan nga mga interaksyon sa estado naglihok sa lagda sa "mga kaatbang nga makadani." Pananglitan, mahimo kang adunay medium nga SPE nga adunay positibo nga karga sa ibabaw niini. Aron mabalanse ang positibo nga gikargahan nga nawong, kasagaran adunay negatibo nga gikargahan nga mga espisye (usa ka anion) nga una nga gigapos niini. Kung ang imong negatibo nga gikarga nga analyte gipaila sa sistema, kini adunay katakus nga mabalhin ang una nga gigapos nga anion ug makig-uban sa positibo nga gikargahan nga sulud sa SPE. Nagresulta kini sa pagpabilin sa analyte sa yugto sa SPE. Kini nga pagbayloay sa mga anion gitawag nga "Anion Exchange" ug usa lamang ka pananglitan sa mas lapad nga kategorya sa "Ion Exchange" nga mga produkto sa SPE. Niini nga pananglitan, ang mga espisye nga adunay positibo nga bayad adunay kusog nga insentibo nga magpabilin sa mobile phase ug dili makig-uban sa positibo nga gikargahan nga SPE nga nawong, aron dili sila mapadayon. Ug, gawas kung ang nawong sa SPE adunay lain nga mga kinaiya dugang pa sa mga kabtangan sa pagbaylo sa ion niini, ang mga neyutral nga mga espisye mahimo usab nga gamay nga mapadayon (bisan pa, ang ingon nga sinagol nga mga produkto sa SPE naglungtad, nga gitugotan ka nga magamit ang pagbinayloay sa ion ug mga mekanismo sa pagpadayon sa gibalik nga yugto sa parehas nga medium nga SPE ).

Usa ka hinungdanon nga kalainan nga hinumdoman kung mogamit mga mekanismo sa pagbinayloay sa ion mao ang kinaiya sa kahimtang sa singil sa analyte. Kung ang analyte kanunay nga gi-charge, bisan unsa pa ang pH sa solusyon nga naa niini, kini giisip nga usa ka "lig-on" nga espisye. Kung ang analyte gi-charge lamang ubos sa pipila ka mga kondisyon sa pH, kini giisip nga usa ka "huyang" nga espisye. Kana usa ka importante nga kinaiya nga masabtan bahin sa imong mga analytes tungod kay kini ang magtino kung unsang klase sa SPE media ang gamiton. Sa kinatibuk-an nga mga termino, ang paghunahuna bahin sa mga kaatbang nga magkauban makatabang dinhi. Kini mao ang advisable sa pagpares sa usa ka mahuyang nga ion exchange SPE sorbent uban sa usa ka "lig-on" nga espisye ug usa ka lig-on nga ion exchange sorbent uban sa usa ka "huyang" analyte.


Oras sa pag-post: Mar-19-2021