Ang nucleic acid gibahin ngadto sa deoxyribonucleic acid (DNA) ug ribonucleic acid (RNA), diin ang RNA mahimong bahinon ngadto sa ribosomal RNA (rRNA), messenger RNA (mRNA) ug transfer RNA (tRNA) sumala sa lain-laing mga gimbuhaton.

Ang DNA nag-una nga gikonsentrar sa nucleus, mitochondria ug chloroplasts, samtang ang RNA kay giapod-apod sa cytoplasm.

Tungod kay ang purine base ug pyrimidine base adunay conjugated double bonds sa nucleic acids, nucleic acids adunay mga kinaiya sa ultraviolet absorption. Ang pagsuyup sa ultraviolet sa mga asin sa sodium sa DNA hapit sa 260nm, ug ang pagsuyup niini gipahayag nga A260, ug kini naa sa trough sa pagsuyup sa 230nm, mao nga magamit ang ultraviolet spectroscopy. Ang mga nucleic acid gitino sa quantitatively ug qualitatively pinaagi sa luminometer.

Ang mga nucleic acid kay mga ampholyte, nga katumbas sa polyacids. Ang mga nucleic acid mahimong ma-dissociated ngadto sa mga anion pinaagi sa paggamit sa neutral o alkaline buffers, ug ibutang sa usa ka electric field aron mobalhin paingon sa anode. Kini ang prinsipyo sa electrophoresis.

Mga prinsipyo ug mga kinahanglanon sa pagkuha ug pagputli sa nucleic acid

1. Siguruha ang integridad sa panguna nga istruktura sa nucleic acid

2. Pagwagtang sa kontaminasyon sa ubang mga molekula (sama sa dili pagapil sa RNA interference sa pagkuha sa DNA)

3. Kinahanglang walay mga organikong solvent ug taas nga konsentrasyon sa mga ion nga metal nga makapugong sa mga enzyme sa mga sample sa nucleic acid

4. Bawasan ang macromolecular substances sama sa protina, polysaccharides ug lipids kutob sa mahimo

Nucleic acid extraction ug purification method

1. Pamaagi sa pagkuha sa phenol/chloroform

Giimbento kini niadtong 1956. Human sa pagtratar sa cell broken liquid o tissue homogenate nga adunay phenol/chloroform, ang nucleic acid nga mga sangkap, nag-una sa DNA, natunaw sa aqueous phase, ang mga lipid kasagaran anaa sa organic phase, ug ang mga protina nahimutang tali sa duha. mga hugna.

2. Pag-ulan sa alkohol

Ang ethanol mahimong magwagtang sa hydration layer sa nucleic acid ug ibutyag ang negatibo nga gikargahan nga phosphate nga grupo, ug ang positibo nga gikargahan nga mga ion sama sa NA﹢ mahimong maghiusa sa phosphate nga grupo aron mahimong usa ka precipitate.

3. Chromatographic nga paagi sa kolum

Pinaagi sa espesyal nga silica-based adsorption nga materyal, ang DNA mahimong espesipikong adsorbed, samtang ang RNA ug protina mahimong moagi sa hapsay, ug unya mogamit sa taas nga asin ug ubos nga pH sa paggapos sa nucleic acid, ug elute uban sa ubos nga asin ug taas nga pH sa pagbulag ug pagputli sa nucleic asido.

4. Thermal cracking alkali nga pamaagi

Ang pagkuha sa alkaline kasagaran naggamit sa mga topological nga kalainan tali sa covalently closed circular plasmids ug linear chromatin aron mabulag sila. Ubos sa alkaline nga kondisyon, ang mga denatured nga protina matunaw.

5. Pagpabukal pyrolysis nga pamaagi

Ang solusyon sa DNA kay heat-treated aron mapahimuslan ang mga kabtangan sa linear DNA molecules aron mabulag ang mga tipik sa DNA gikan sa precipitate nga naporma sa denatured proteins ug cellular debris pinaagi sa centrifugation.

6. Nanomagnetic beads nga pamaagi

Gigamit ang nanotechnology aron mapaayo ug mabag-o ang nawong sa superparamagnetic nanoparticle, giandam ang superparamagnetic silicon oxide nano-magnetic beads. Ang magnetic beads espesipikong makaila ug epektibong makagapos sa mga molekula sa nucleic acid sa mikroskopikong interface. Gamit ang superparamagnetic nga mga kabtangan sa silica nanospheres, ubos sa aksyon sa Chaotropic salts (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, ug uban pa) ug usa ka eksternal nga magnetic field, ang DNA ug RNA nahimulag gikan sa dugo, tissue sa hayop, pagkaon, pathogenic microorganisms ug uban pang mga sample .