Pamaagi sapagputli sa protina:

Ang pamaagi sa pagputli sa protina, pagbulag ug pagputli sa protina, ang protina gibuhian gikan sa orihinal nga mga selula o mga tisyu sa usa ka dissolved nga kahimtang ug nagpabilin sa orihinal nga natural nga kahimtang nga walay pagkawala sa biological nga kalihokan. Tungod niini nga hinungdan, ang materyal kinahanglan nga magtangtang sa tisyu sa hayop ug adipose, ang materyal nga liso kinahanglan nga tangtangon ang kontaminasyon sa coat nga liso gikan sa mga sangkap sama sa tannins, ug ang liso sa lana kinahanglan nga labing maayo nga mogamit usa ka gamay nga nagbukal nga organikong solvent.

1. Ang pamaagi sa pagputli sa protina, gidak-on ug lain-laing mga pamaagi sa pag-analisa sa pagbulag: ang dialysis ug ultrafiltration naggamit niini nga mga protina aron moagi sa kinaiyahan sa mga molekula nga dili makaagi sa semi-permeable membrane; density gradient centrifugation Ang kalidad ug densidad sa protina sa medium adunay mas dako nga epekto sa mga partikulo. Ang tulin sa paghusay mas paspas; Ang pagsala sa gel usa ka klase sa chromatography sa kolum.

2. Pagbulag sa pagkalainlain sa solubility sa paggamit: electro-precipitation tungod kay ang pukot nga bayad sa mga molekula sa protina anaa sa zero isoelectric nga punto, nga nagpakunhod sa electrostatic repulsion tali sa mga molekula, sayon ​​​​sa pagtipon, ug minimum nga solubility; solusyon sa asin nga gigamit sa solusyon sa asin Ang konsentrasyon nagdugang o nagpamenos sa solubility sa protina.

3. Ang bayad gibulag ug gisusi sa lainlaing mga pamaagi, ang panguna nga sulud naglakip sa electrophoresis ug ion exchange chromatography.

4. Pamaagi sapagputli sa protinaAng pinili nga adsorption ug pagbulag sa mga protina naggamit sa kusog sa particle adsorption.

5. Ang affinity chromatography gibase sa pagbulag sa mga ligand. Kining biyolohikal nga kinaiya nagtugot sa mga molekula sa protina sa pagbugkos ilabina kay sa covalently ngadto sa laing molekula nga gitawag ug ligand.

6. Pamaagi sa pagputli sa protina: Ubos nga temperatura nga organikong solvent nga pamaagi sa pag-ulan: Paggamit sa mga organikong solvent nga masagol sa tubig, sama sa methanol, ethanol, aron makunhuran ang solubility ug precipitation sa kadaghanan sa mga protina. Kini nga pamaagi mao ang mas taas pa kay sa resolusyon salting out, apan ang protina denatures mas Kon sayon, kini kinahanglan nga buhaton sa ubos nga temperatura.

Unsaon pagputlipagputli sa protina:

Sa unsa nga paagi sa pagputli sa protina, protina mao ang usa ka dako nga molekula, ug lain-laing mga molekular gidak-on sa albumin, adunay pipila ka mas simple nga mga pamaagi sa pagbulag sa protina ug gagmay nga mga molekula nga mga materyales, ug usab mibulag protina sagol. Ang mga nag-unang pamaagi sa pagbulag sa mga protina nga lainlain ang gidak-on sa molekula mao ang dialysis, ultrafiltration, gel filtration, ug centrifugal separation. Ang dialysis ug ultrafiltration kasagarang gigamit sa mga pamaagi sa pagbulag sa protina. Ang dialysis mixture nga ibulag ibutang sa usa ka dialysis bag nga hinimo sa semipermeable membrane, ug dayon ituslob sa dialysis solution para sa separation. Ang ultrafiltration mao ang proseso sa pagpasa sa tubig ug uban pang gagmay nga mga molekula gamit ang centrifugal force o pressure sa usa ka semi-permeable membrane ug pag-trap sa mga protina sa semi-permeable membrane. Kining duha ka mga pamaagi mahimong mabulag gikan sa mga macromolecule nga nakabase sa protina ug mga gagmay nga molekula nga nakabase sa asin nga dili organiko. Kanunay kini nga gi-asin, gigamit kauban ang pamaagi sa pagtunaw sa asin, o mahimo nga ipaila aron makuha kining duha ka mga pamaagi pagkahuman sa pag-asin gamit ang dili organikong solusyon sa asin.

1. Sa unsa nga paagi sa pagputli sa protina pinaagi sa salting-out nga paagi: Ang basehan sa salting-out nga paagi mao nga ang solubility sa protina sa dilute salt solution mosaka uban sa pagtaas sa asin konsentrasyon, apan sa diha nga ang asin konsentrasyon sa pagtaas sa usa ka piho nga bili, ang ang kalihokan sa tubig madugangan. Ang pagkunhod, nga sa baylo mahimong hinungdan sa pipila ka mga protina nga makamugna og mga singil pinaagi sa molekular nga estraktura sa nawong nga anam-anam nga ma-neutralize, ug ang hydration membrane anam-anam nga malaglag, nga sa kadugayan mahimong hinungdan sa mga may kalabutan nga mga protina ug mga molekula sa pagpalambo sa agglomeration ug precipitate gikan sa lainlaing mga solusyon.

2. Organic solvent precipitation method: Adunay duha ka rason sa pagpakunhod sa solubility sa protina sa organic solvents: unsaon pagputli sa protina isip solusyon sa asin nga adunay dehydration; ikaduha, ang dielectric nga kanunay sa organic solvents kay sa tubig mahimong pagkunhod Sa polar solvents.

3. Protein precipitating agent: ang protina isip usa ka precipitating agent naglihok lamang sa usa ka matang o usa sa protein precipitation, ang kasagaran kay alkaline, protein, lectin, ug heavy metals.

4. Polyethylene glycol precipitation: Sa unsa nga paagi sa pagputli sa tubig-soluble non-ionic polymers alang sapagputli sa protina, sama sa polyethylene glycol ug sodium dextran sulfate aron ma-precipitate ang mga protina.