Quin és el mètode de purificació del sistema de purificació de proteïnes

Quin és el mètode de purificació delsistema de purificació de proteïnes? Cal conèixer la seqüència d'ADN codificant de la proteïna purificada, veure quines cèl·lules o teixits estan sobreexpressats en el gen diana i dissenyar cebadors gènics per amplificar l'arf del fragment d'ADN diana. Aquesta és l'anomenada adquisició de fragments de gens diana.

Construcció del vector d'expressió: En el vector d'expressió procariota o eucariota amb les característiques de la pròpia expressió gènica obtinguda, el principal problema d'aquest pas és construir el plasmidi i el gen d'interès, i el sistema d'expressió. El temps d'expressió procariota és curt, el cost és baix i una gran quantitat d'expressió és una prioritat; el gen no s'expressa a E. coli, i el problema es produeix en l'optimització de codons. Tenint en compte una millor activitat i purificació de la proteïna, els investigadors van optar per expressar-se en llevat Pichi. L'expressió reeixida de l'optimització de codons és important.

19

Quin és el mètode de purificació del sistema de purificació de proteïnes:

1. Precipitacions.

2. Electroforesi: Una proteïna carregada és més alta o més baixa que el seu punt isoelèctric i es pot traslladar a l'elèctrode negatiu o a l'elèctrode positiu del camp elèctric en el camp elèctric. Suport d'electroforesi de pel·lícula, electroforesi, etc.

3. Diàlisi: mètode que utilitza dues bosses de diàlisi per separar molècules grans de proteïnes i compostos orgànics moleculars petits.

4. Cromatografia: La cromatografia d'intercanvi iònic utilitza les propietats lliures de les proteïnes. Sota un pH específic, les càrregues i propietats de les proteïnes són diferents i es poden separar mitjançant cromatografia d'intercanvi iònic. En la cromatografia d'intercanvi aniònic, primer s'elueixen les proteïnes amb baix poder negatiu. Tamisos moleculars, també coneguts com a filtració en gel. Les proteïnes petites entren als porus i hi romanen durant molt de temps. Les proteïnes grans no poden entrar als porus i sortir directament.

5. Quin és el mètode de purificació delsistema de purificació de proteïnes? Ultracentrifugació: la purificació de proteïnes es pot utilitzar per determinar el pes molecular i es pot utilitzar com a proteïna. Es separa la formació de proteïnes amb diferents densitats.


Hora de publicació: 21-abril-2021