La separació i purificació de proteïnes s'utilitza àmpliament en la investigació i l'aplicació de la bioquímica i és una habilitat operativa important. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ha recopilat el contingut de separació bruta i de separació finaproteïnapurificació per a tothom. Una cèl·lula eucariota típica pot contenir milers de proteïnes diferents, algunes són molt riques i algunes contenen només unes poques còpies. Per estudiar una determinada proteïna, primer cal purificar la proteïna d'altres proteïnes i molècules no proteiques.

Separació gruixuda

Quan s'obté l'extracte proteic (de vegades barrejat amb àcids nucleics, polisacàrids, etc.), es selecciona un conjunt de mètodes adequats per separar el desitjat.proteïnad'altres impureses. En general, aquest pas de separació utilitza mètodes com ara la sal, l'acumulació de punts isoelèctrics i el fraccionament de dissolvents orgànics. Aquests mètodes es caracteritzen per la simplicitat i la gran capacitat de processament, que poden eliminar moltes impureses i concentrar la solució de proteïnes. Alguns extractes de proteïnes tenen un gran volum i no són adequats per a la concentració per acumulació o sal. Podeu triar ultrafiltració, filtració en gel, assecat al buit per congelació o altres mètodes de concentració.

Separació fina

Després del fraccionament aproximat de la mostra, el volum és generalment petit i la majoria de les impureses s'han eliminat. Per a una purificació addicional, els mètodes de cromatografia inclouen generalment la filtració en gel, la cromatografia d'intercanvi iònic, la cromatografia d'adsorció i la cromatografia d'afinitat. Si cal, també podeu triar l'electroforesi, inclosa l'electroforesi de zona, el conjunt de punts isoelèctrics, etc. com a procés de purificació final. El mètode utilitzat per a la separació del nivell de subdivisió és generalment petit en la planificació, però amb una alta resolució.

La cristal·lització és el procés final de separació i purificació de proteïnes. Encara que el procés de cristal·lització no garanteix que la proteïna hagi de ser uniforme, és només quan una determinada proteïna té un avantatge en la solució per formar un cristall. El procés de cristal·lització en si s'acompanya d'un cert grau de purificació i la recristal·lització pot eliminar una petita quantitat de proteïna adulterada. Des de desnaturalitzatproteïnamai s'ha trobat durant el procés de cristal·lització, la cristal·lització de proteïnes no només és un signe de puresa, sinó també una poderosa pauta per determinar que el producte es troba en el seu estat natural.