Mètodes i purificació de purificació de proteïnes

Mètodes depurificació de proteïnes:

El mètode de purificació de proteïnes, separació i purificació de proteïnes, la proteïna s'allibera de les cèl·lules o teixits originals en estat dissolt i es manté en l'estat natural original sense pèrdua d'activitat biològica. Per aquest motiu, el material ha d'eliminar el teixit animal i adipós, el material de la llavor fins i tot hauria d'eliminar la contaminació de la capa de la llavor de substàncies com els tanins, i la llavor oleaginosa hauria d'utilitzar preferiblement un dissolvent orgànic de baix punt d'ebullició.

1. El mètode de purificació de proteïnes, mida i diferents mètodes d'anàlisi de separació: la diàlisi i la ultrafiltració utilitzen aquestes proteïnes per passar per la naturalesa de molècules que no poden passar per la membrana semipermeable; centrifugació en gradient de densitat La qualitat i la densitat de la proteïna en el medi tindrà un impacte més gran sobre les partícules. La velocitat de sedimentació és més ràpida; La filtració en gel és una mena de cromatografia en columna.

2. Separació de la diferència de solubilitat en l'ús: electro-precipitació perquè la càrrega neta de les molècules de proteïnes es troba al punt isoelèctric zero, reduint la repulsió electrostàtica entre molècules, fàcil d'agregar i solubilitat mínima; solució salina utilitzada amb solució salina La concentració augmenta o disminueix la solubilitat de la proteïna.

3. La càrrega es separa i analitza per diferents mètodes, els continguts principals inclouen l'electroforesi i la cromatografia d'intercanvi iònic.

4. Mètodes depurificació de proteïnesL'adsorció selectiva i la separació de proteïnes utilitzen la força de l'adsorció de partícules.

5. La cromatografia d'afinitat es basa en la separació de lligands. Aquesta característica biològica permet que les molècules de proteïnes s'uneixin específicament i no de manera covalent a una altra molècula anomenada lligand.

6. Mètode de purificació de proteïnes: Mètode de precipitació amb dissolvents orgànics a baixa temperatura: Utilitzeu dissolvents orgànics miscibles amb aigua, com el metanol, l'etanol, per reduir la solubilitat i la precipitació de la majoria de proteïnes. Aquest mètode és més alt que la resolució de sal, però la proteïna es desnaturalitza més Quan sigui fàcil, s'ha de fer a baixa temperatura.

6ca4b93f5

Com purificarpurificació de proteïnes:

Com purificar proteïnes, la proteïna és una molècula gran i diverses mides moleculars d'albúmina, hi ha alguns mètodes més senzills per separar les proteïnes i els materials de molècules petites, i també la barreja de proteïnes separades. Els principals mètodes per separar proteïnes de diferents mides moleculars són la diàlisi, la ultrafiltració, la filtració en gel i la separació centrífuga. La diàlisi i la ultrafiltració s'utilitzen habitualment en mètodes de separació de proteïnes. La mescla de diàlisi a separar es col·loca en una bossa de diàlisi feta d'una membrana semipermeable, i després es submergeix a la solució de diàlisi per a la separació. La ultrafiltració és el procés de passar aigua i altres molècules petites utilitzant força o pressió centrífuga en una membrana semipermeable i atrapant proteïnes a la membrana semipermeable. Aquests dos mètodes es poden separar de macromolècules basades en proteïnes i molècules petites basades en sals inorgàniques. Sovint es sala, s'utilitzen conjuntament amb el mètode de dissolució de sal, o es poden introduir per treure aquests dos mètodes després de salar amb solucions de sal inorgànica.

1. Com purificar proteïnes mitjançant el mètode de sal: la base del mètode de sal és que la solubilitat de la proteïna en la solució de sal diluïda augmentarà amb l'augment de la concentració de sal, però quan la concentració de sal augmenta fins a un cert valor, el augmentarà l'activitat de l'aigua. Disminució, que al seu torn pot fer que algunes proteïnes generin càrregues a través de la superfície de l'estructura molecular que es neutralitzen gradualment i la membrana d'hidratació es destrueixi gradualment, cosa que pot provocar que les proteïnes i molècules relacionades desenvolupin aglomeracions i precipitin a partir de diferents solucions.

2. Mètode de precipitació amb dissolvent orgànic: hi ha dues raons per reduir la solubilitat de la proteïna en dissolvents orgànics: com purificar la proteïna com a solució salina amb deshidratació; en segon lloc, la constant dielèctrica dels dissolvents orgànics que l'aigua es pot reduir en dissolvents polars.

3. Agent precipitant de proteïnes: la proteïna com a agent precipitant només actua sobre un tipus o un de precipitació de proteïnes, els comuns són els alcalins, proteïnes, lectines i metalls pesants.

4. Precipitació de polietilenglicol: com purificar polímers no iònics solubles en aigua perpurificació de proteïnes, com el polietilenglicol i el sulfat de dextrano sòdic per precipitar proteïnes.


Hora de publicació: 27-octubre-2020