Koja je metoda prečišćavanjasistem za prečišćavanje proteina? Neophodno je znati kodirajuću sekvencu DNK pročišćenog proteina, vidjeti koje ćelije ili tkiva su prekomjerno eksprimirane u ciljnom genu i dizajnirati genske prajmere za amplifikaciju arf-a ciljnog DNK fragmenta. Ovo je takozvana akvizicija fragmenata ciljnog gena.

Konstrukcija ekspresionog vektora: U prokariotskom ili eukariotskom ekspresionom vektoru sa karakteristikama same ekspresije dobijenog gena, glavni problem ovog koraka je konstruisanje plazmida i gena od interesa, i ekspresionog sistema. Vrijeme ekspresije prokariota je kratko, cijena je niska, a velika količina ekspresije je prioritet; gen nije eksprimiran u E. coli, a problem se javlja u optimizaciji kodona. Uzimajući u obzir bolju aktivnost i pročišćavanje proteina, istraživači su odabrali ekspresiju u Pichi kvascu. Uspješno izražavanje optimizacije kodona je važno.

Koja je metoda prečišćavanja sistema za prečišćavanje proteina:

1. Padavine.

2. Elektroforeza: Nabijeni protein je viši ili niži od svoje izoelektrične tačke i može se premjestiti na negativnu elektrodu ili pozitivnu elektrodu električnog polja u električnom polju. Podržava filmsku elektroforezu, elektroforezu itd.

3. Dijaliza: Metoda koja koristi dvije vrećice za dijalizu za odvajanje velikih molekula od proteina i malih molekularnih organskih spojeva.

4. Kromatografija: hromatografija ionske izmjene koristi slobodna svojstva proteina. Pod određenim pH, naboji i svojstva proteina su različiti i mogu se razdvojiti hromatografijom za izmjenu jona. U hromatografiji s izmjenom anjona, proteini s malom negativnom snagom se prvo eluiraju. Molekularna sita, poznata i kao gel filtracija. Mali proteini ulaze u pore i ostaju u njima dugo vremena. Veliki proteini ne mogu ući u pore i direktno istjecati.

5. Koja je metoda prečišćavanjasistem za prečišćavanje proteina? Ultracentrifugiranje: Pročišćavanje proteina se može koristiti za određivanje molekulske težine i može se koristiti kao protein. Formiranje proteina različite gustine je odvojeno.