Metodeprečišćavanje proteina:

Metoda pročišćavanja proteina, odvajanja i pročišćavanja proteina, protein se oslobađa iz originalnih ćelija ili tkiva u otopljenom stanju i ostaje u izvornom prirodnom stanju bez gubitka biološke aktivnosti. Iz tog razloga, materijal bi trebao ukloniti životinjsko i masno tkivo, sjemenski materijal bi trebao čak i odlijepiti kontaminaciju sjemenske ovojnice od supstanci kao što su tanini, a uljno sjeme bi po mogućnosti trebalo koristiti organsko otapalo niske temperature.

1. Metoda prečišćavanja proteina, veličina i različite metode analize razdvajanja: dijaliza i ultrafiltracija koriste ove proteine ​​da prođu kroz prirodu molekula koji ne mogu proći kroz polupropusnu membranu; Centrifugiranje u gradijentu gustine Kvalitet i gustina proteina u medijumu imaće veći uticaj na čestice. Brzina taloženja je veća; gel filtracija je vrsta kolonske hromatografije.

2. Odvajanje razlike u rastvorljivosti u upotrebi: elektroprecipitacija jer je neto naboj proteinskih molekula na nultoj izoelektričnoj tački, smanjuje elektrostatičko odbijanje između molekula, lako se agregira i minimalna rastvorljivost; rastvor soli koji se koristi sa rastvorom soli Koncentracija povećava ili smanjuje rastvorljivost proteina.

3. Naboj se odvaja i analizira različitim metodama, glavni sadržaj uključuje elektroforezu i hromatografiju za izmjenu jona.

4. Metodeprečišćavanje proteinaSelektivna adsorpcija i odvajanje proteina koristi snagu adsorpcije čestica.

5. Afinitetna hromatografija se zasniva na razdvajanju liganada. Ova biološka karakteristika omogućava proteinskim molekulima da se vežu specifično, a ne kovalentno za drugi molekul koji se zove ligand.

6. Metoda prečišćavanja proteina: Metoda precipitacije organskim rastvaračem na niskoj temperaturi: Koristite organske rastvarače koji se miješaju s vodom, kao što su metanol, etanol, da biste smanjili rastvorljivost i taloženje većine proteina. Ova metoda je veća od rezolucije isoljavanja, ali protein više denaturira. Kada je lak, to treba učiniti na niskoj temperaturi.

Kako se pročistitiprečišćavanje proteina:

Kako pročistiti protein, protein je velika molekula, a različite molekularne veličine albumina, postoje neke jednostavnije metode za odvajanje proteina i materijala malih molekula, kao i odvojene mješavine proteina. Glavne metode za odvajanje proteina različitih veličina molekula su dijaliza, ultrafiltracija, gel filtracija i centrifugalna separacija. Dijaliza i ultrafiltracija se obično koriste u metodama odvajanja proteina. Smjesa za dijalizu koju treba odvojiti stavlja se u vrećicu za dijalizu napravljenu od polupropusne membrane, a zatim se uroni u otopinu za dijalizu radi odvajanja. Ultrafiltracija je proces propuštanja vode i drugih malih molekula pomoću centrifugalne sile ili pritiska u polupropusnoj membrani i zarobljavanja proteina u polupropusnoj membrani. Ove dvije metode mogu se odvojiti od makromolekula na bazi proteina i malih molekula na bazi anorganske soli. Često se sole, koriste zajedno s metodom otapanja soli, ili se mogu uvesti za uklanjanje ove dvije metode nakon soljenja korištenjem neorganskih otopina soli.

1. Kako pročistiti protein metodom isoljavanja: Osnova metode isoljavanja je da će se rastvorljivost proteina u razrijeđenoj otopini soli povećavati s povećanjem koncentracije soli, ali kada se koncentracija soli poveća na određenu vrijednost, aktivnost vode će biti povećana. Smanjenje, što zauzvrat može uzrokovati da neki proteini stvaraju naboje kroz površinu molekularne strukture da se postupno neutraliziraju, a hidratacijska membrana se postepeno uništava, što na kraju može uzrokovati srodne proteine ​​i molekule da razviju aglomeraciju i taloženje iz različitih otopina.

2. Metoda precipitacije organskim rastvaračima: Dva su razloga za smanjenje rastvorljivosti proteina u organskim rastvaračima: kako prečistiti protein kao rastvor soli dehidratacijom; drugo, dielektrična konstanta organskih rastvarača od vode može se smanjiti u polarnim rastvaračima.

3. Sredstvo za taloženje proteina: protein kao precipitator djeluje samo na jednu ili jednu vrstu taloženja proteina, uobičajeni su alkalni, proteinski, lektin i teški metali.

4. Taloženje polietilen glikola: Kako prečistiti nejonske polimere rastvorljive u vodi zaprečišćavanje proteina, kao što su polietilen glikol i natrijum dekstran sulfat za taloženje proteina.