এসপিই কয়েক দশক ধরে আছে, এবং সঙ্গত কারণেই। বিজ্ঞানীরা যখন তাদের নমুনা থেকে পটভূমির উপাদানগুলি সরাতে চান, তখন তারা তাদের আগ্রহের যৌগটির উপস্থিতি এবং পরিমাণ সঠিকভাবে এবং সুনির্দিষ্টভাবে নির্ধারণ করার ক্ষমতা হ্রাস না করে এটি করার চ্যালেঞ্জের মুখোমুখি হন। SPE হল একটি কৌশল যা বিজ্ঞানীরা প্রায়শই পরিমাণগত বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত সংবেদনশীল যন্ত্রের জন্য তাদের নমুনা প্রস্তুত করতে সাহায্য করে। SPE শক্তিশালী, নমুনা প্রকারের বিস্তৃত অ্যারের জন্য কাজ করে এবং নতুন SPE পণ্য এবং পদ্ধতিগুলি বিকাশ করা অব্যাহত রয়েছে। এই পদ্ধতিগুলি বিকাশের কেন্দ্রবিন্দুতে একটি উপলব্ধি যে যদিও কৌশলটির নামে "ক্রোমাটোগ্রাফি" শব্দটি উপস্থিত হয় না, তবুও এসপিই ক্রোমাটোগ্রাফিক বিচ্ছেদের একটি রূপ।

SPE: সাইলেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি

একটি পুরানো কথা আছে "যদি একটি গাছ বনে পড়ে, এবং কেউ এটি শুনতে না পায়, তবে এটি কি এখনও শব্দ করে?" এই কথাটি আমাদের মনে করিয়ে দেয় SPE এর কথা। এটা বলতে অদ্ভুত মনে হতে পারে, কিন্তু যখন আমরা SPE এর কথা চিন্তা করি, তখন প্রশ্ন হয়ে যায় "যদি একটি বিচ্ছেদ ঘটে এবং এটি রেকর্ড করার জন্য কোন ডিটেক্টর না থাকে, তাহলে কি সত্যিই ক্রোমাটোগ্রাফি ঘটেছে?" এসপিই-এর ক্ষেত্রে, উত্তর হল "হ্যাঁ!" একটি SPE পদ্ধতির বিকাশ বা সমস্যা সমাধান করার সময়, এটি মনে রাখা খুব সহায়ক হতে পারে যে SPE হল ক্রোমাটোগ্রাম ছাড়াই ক্রোমাটোগ্রাফি। আপনি যখন এটি সম্পর্কে চিন্তা করেন, তখন কি মিখাইল স্বেভেট ছিলেন না, যিনি "ক্রোমাটোগ্রাফির জনক" হিসাবে পরিচিত, আজকে আমরা যাকে "এসপিই" বলব? যখন তিনি উদ্ভিদ রঙ্গকগুলির মিশ্রণগুলিকে মাধ্যাকর্ষণকে বহন করতে দিয়ে, একটি দ্রাবকের মধ্যে দ্রবীভূত করে, গ্রাউন্ড আপ চকের বিছানা দিয়ে আলাদা করেছিলেন, তখন এটি কি একটি আধুনিক SPE পদ্ধতির চেয়ে অনেক আলাদা?

আপনার নমুনা বোঝা

যেহেতু এসপিই ক্রোমাটোগ্রাফিক নীতির উপর ভিত্তি করে, তাই প্রতিটি ভাল এসপিই পদ্ধতির কেন্দ্রবিন্দু হল বিশ্লেষক, ম্যাট্রিক্স, স্থির পর্যায় (এসপিই সরবেন্ট) এবং মোবাইল ফেজ (নমুনা ধোয়া বা নির্মূল করতে ব্যবহৃত দ্রাবক) এর মধ্যে সম্পর্ক। .

আপনার নমুনার প্রকৃতি যতটা সম্ভব বোঝা হল শুরু করার সেরা জায়গা যদি আপনাকে একটি SPE পদ্ধতি বিকাশ বা সমস্যা সমাধান করতে হয়। পদ্ধতির বিকাশের সময় অপ্রয়োজনীয় ট্রায়াল এবং ত্রুটি এড়াতে, আপনার বিশ্লেষক এবং ম্যাট্রিক্স উভয়ের ভৌত এবং রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যের বর্ণনা খুবই সহায়ক। একবার আপনি আপনার নমুনা সম্পর্কে জানলে, আপনি একটি উপযুক্ত SPE পণ্যের সাথে সেই নমুনাটি মেলাতে আরও ভাল অবস্থানে থাকবেন। উদাহরণস্বরূপ, একে অপরের এবং ম্যাট্রিক্সের তুলনায় বিশ্লেষকের আপেক্ষিক মেরুতা জানা আপনাকে সিদ্ধান্ত নিতে সাহায্য করতে পারে যে ম্যাট্রিক্স থেকে বিশ্লেষককে পৃথক করার জন্য পোলারিটি ব্যবহার করা সঠিক পদ্ধতি। আপনার বিশ্লেষকগুলি নিরপেক্ষ বা চার্জযুক্ত অবস্থায় থাকতে পারে কিনা তা জেনেও আপনাকে এসপিই পণ্যগুলির দিকে পরিচালিত করতে সহায়তা করতে পারে যা নিরপেক্ষ, ইতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত বা নেতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত প্রজাতিগুলিকে ধরে রাখতে বা এলুটিং করতে বিশেষজ্ঞ। এই দুটি ধারণা SPE পদ্ধতির বিকাশ এবং SPE পণ্য নির্বাচন করার সময় লিভারেজের জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত দুটি বিশ্লেষণী বৈশিষ্ট্যের প্রতিনিধিত্ব করে। আপনি যদি এই পদগুলিতে আপনার বিশ্লেষক এবং বিশিষ্ট ম্যাট্রিক্স উপাদানগুলি বর্ণনা করতে পারেন তবে আপনি আপনার SPE পদ্ধতির বিকাশের জন্য একটি ভাল দিকনির্দেশ বাছাই করার পথে রয়েছেন।

অ্যাফিনিটি দ্বারা বিচ্ছেদ

যে নীতিগুলি একটি এলসি কলামের মধ্যে ঘটে যাওয়া বিচ্ছেদগুলিকে সংজ্ঞায়িত করে, উদাহরণস্বরূপ, একটি এসপিই বিচ্ছেদে খেলা হয়৷ যেকোন ক্রোমাটোগ্রাফিক বিভাজনের ভিত্তি হল এমন একটি সিস্টেম স্থাপন করা যা নমুনার উপাদান এবং কলাম বা এসপিই কার্টিজে উপস্থিত দুটি পর্যায়, মোবাইল ফেজ এবং স্থির পর্যায়ের মধ্যে মিথস্ক্রিয়া বিভিন্ন মাত্রার রয়েছে।

SPE পদ্ধতির বিকাশের সাথে স্বাচ্ছন্দ্য বোধ করার প্রথম পদক্ষেপগুলির মধ্যে একটি হল SPE পৃথকীকরণে নিযুক্ত দুটি সর্বাধিক সম্মুখীন ধরনের মিথস্ক্রিয়াগুলির সাথে পরিচিত হওয়া: পোলারিটি এবং/অথবা চার্জ অবস্থা।

পোলারিটি

আপনি যদি আপনার নমুনা পরিষ্কার করার জন্য পোলারিটি ব্যবহার করতে যাচ্ছেন, তবে আপনাকে প্রথম পছন্দগুলির মধ্যে একটি হল সিদ্ধান্ত নেওয়া যে "মোড" সেরা। তুলনামূলকভাবে পোলার এসপিই মাধ্যম এবং তুলনামূলকভাবে ননপোলার মোবাইল ফেজ (অর্থাৎ স্বাভাবিক মোড) বা বিপরীত, তুলনামূলকভাবে ননপোলার এসপিই মাধ্যম এবং তুলনামূলকভাবে পোলার মোবাইল ফেজ (অর্থাৎ বিপরীত মোড, তাই নামকরণ করা হয়েছে কারণ এটি বিপরীত। প্রাথমিকভাবে প্রতিষ্ঠিত "স্বাভাবিক মোড")।

আপনি যখন SPE পণ্যগুলি অন্বেষণ করবেন, আপনি দেখতে পাবেন যে SPE পর্যায়গুলি বিভিন্ন মেরুতে বিদ্যমান। অধিকন্তু, মোবাইল ফেজ দ্রাবকের পছন্দও বিস্তৃত পোলারিটি অফার করে, প্রায়শই দ্রাবক, বাফার বা অন্যান্য সংযোজনগুলির মিশ্রণের মাধ্যমে খুব টিউনযোগ্য। আপনার বিশ্লেষকগুলিকে ম্যাট্রিক্স হস্তক্ষেপ (বা একে অপরের থেকে) থেকে আলাদা করতে শোষণ করার মূল বৈশিষ্ট্য হিসাবে পোলারিটি পার্থক্যগুলি ব্যবহার করার সময় প্রচুর সূক্ষ্মতা সম্ভব।

আপনি যখন বিচ্ছেদের চালক হিসাবে পোলারিটি বিবেচনা করছেন তখন শুধু পুরানো রসায়ন প্রবাদটি মনে রাখবেন "যেমন দ্রবীভূত হয়"। একটি যৌগ একটি মোবাইল বা স্থির পর্যায়ের মেরুত্বের সাথে যত বেশি একই রকম, এটির আরও জোরালোভাবে যোগাযোগ করার সম্ভাবনা তত বেশি। স্থির পর্যায়ের সাথে শক্তিশালী মিথস্ক্রিয়া এসপিই মাধ্যমের দীর্ঘক্ষণ ধরে রাখার দিকে পরিচালিত করে। মোবাইল ফেজের সাথে দৃঢ় মিথস্ক্রিয়া কম ধারণ এবং পূর্বে বিলুপ্তির দিকে পরিচালিত করে।

চার্জ রাজ্য

যদি আগ্রহের বিশ্লেষকগুলি হয় সর্বদা চার্জযুক্ত অবস্থায় থাকে বা যে দ্রবণে তারা দ্রবীভূত হয় (যেমন pH) এর শর্ত অনুসারে চার্জযুক্ত অবস্থায় রাখতে সক্ষম হয়, তাহলে তাদের ম্যাট্রিক্স (বা প্রতিটি) থেকে আলাদা করার আরেকটি শক্তিশালী উপায় অন্যান্য) এসপিই মিডিয়া ব্যবহারের মাধ্যমে যা তাদের নিজস্ব চার্জ দিয়ে আকৃষ্ট করতে পারে।

এই ক্ষেত্রে, ক্লাসিক ইলেক্ট্রোস্ট্যাটিক আকর্ষণ নিয়ম প্রযোজ্য। বিচ্ছেদের বিপরীতে যা মেরুত্ব বৈশিষ্ট্যের উপর নির্ভর করে এবং মিথস্ক্রিয়াগুলির মডেল "লাইক দ্রবীভূত হয়", চার্জযুক্ত রাষ্ট্রের মিথস্ক্রিয়াগুলি "বিপরীত আকর্ষণ" এর নিয়মে কাজ করে। উদাহরণস্বরূপ, আপনার একটি SPE মাধ্যম থাকতে পারে যার পৃষ্ঠে একটি ইতিবাচক চার্জ রয়েছে। ধনাত্মক চার্জযুক্ত পৃষ্ঠের ভারসাম্য বজায় রাখতে, সাধারণত একটি নেতিবাচক চার্জযুক্ত প্রজাতি (একটি অ্যানিয়ন) প্রাথমিকভাবে এটির সাথে আবদ্ধ থাকে। যদি আপনার ঋণাত্মক চার্জযুক্ত বিশ্লেষক সিস্টেমে প্রবর্তিত হয়, তবে এটি প্রাথমিকভাবে আবদ্ধ অ্যানিয়নকে স্থানচ্যুত করার এবং ইতিবাচক চার্জযুক্ত SPE পৃষ্ঠের সাথে ইন্টারঅ্যাক্ট করার ক্ষমতা রাখে। এর ফলে SPE পর্বে বিশ্লেষক ধরে রাখা হয়। অ্যানিয়নগুলির এই অদলবদলটিকে "অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ" বলা হয় এবং এটি "আয়ন এক্সচেঞ্জ" SPE পণ্যগুলির বিস্তৃত বিভাগের একটি উদাহরণ মাত্র। এই উদাহরণে, ইতিবাচক চার্জযুক্ত প্রজাতিগুলি মোবাইল ফেজে থাকার এবং ইতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত SPE পৃষ্ঠের সাথে যোগাযোগ না করার জন্য একটি শক্তিশালী উত্সাহ পাবে, তাই সেগুলিকে ধরে রাখা হবে না। এবং, এসপিই পৃষ্ঠের আয়ন বিনিময় বৈশিষ্ট্য ছাড়াও অন্যান্য বৈশিষ্ট্য না থাকলে, নিরপেক্ষ প্রজাতিগুলিও ন্যূনতমভাবে ধরে রাখা হবে (যদিও, এই ধরনের মিশ্রিত এসপিই পণ্য বিদ্যমান রয়েছে, যা আপনাকে একই এসপিই মাধ্যমে আয়ন বিনিময় এবং বিপরীত ফেজ ধারণ প্রক্রিয়া ব্যবহার করতে দেয়। )

আয়ন বিনিময় প্রক্রিয়া ব্যবহার করার সময় মনে রাখতে হবে একটি গুরুত্বপূর্ণ পার্থক্য হল বিশ্লেষকের চার্জ অবস্থার প্রকৃতি। যদি বিশ্লেষক সর্বদা চার্জ করা হয়, এটি যে দ্রবণটিতে রয়েছে তার pH নির্বিশেষে, এটি একটি "শক্তিশালী" প্রজাতি হিসাবে বিবেচিত হয়। যদি বিশ্লেষক শুধুমাত্র নির্দিষ্ট pH অবস্থার অধীনে চার্জ করা হয় তবে এটি একটি "দুর্বল" প্রজাতি হিসাবে বিবেচিত হয়। এটি আপনার বিশ্লেষক সম্পর্কে বোঝার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য কারণ এটি নির্ধারণ করবে কোন ধরনের SPE মিডিয়া ব্যবহার করতে হবে। সাধারণভাবে, বিপরীতগুলি একসাথে যাওয়ার বিষয়ে চিন্তা করা এখানে সাহায্য করবে। একটি "শক্তিশালী" প্রজাতির সাথে একটি দুর্বল আয়ন এক্সচেঞ্জ SPE সরবেন্ট এবং একটি "দুর্বল" বিশ্লেষকের সাথে একটি শক্তিশালী আয়ন বিনিময় সরবেন্ট যুক্ত করার পরামর্শ দেওয়া হয়।