নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন কলাম নিষ্কাশন পদ্ধতি এবং নীতি

নিউক্লিক অ্যাসিড ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (ডিএনএ) এবং রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (আরএনএ) এ বিভক্ত, যার মধ্যে আরএনএকে রাইবোসোমাল আরএনএ (আরআরএনএ), মেসেঞ্জার আরএনএ (এমআরএনএ) এবং ট্রান্সফার আরএনএ (টিআরএনএ) বিভিন্ন ফাংশন অনুসারে ভাগ করা যায়।

ডিএনএ প্রধানত নিউক্লিয়াস, মাইটোকন্ড্রিয়া এবং ক্লোরোপ্লাস্টে কেন্দ্রীভূত হয়, যখন আরএনএ প্রধানত সাইটোপ্লাজমে বিতরণ করা হয়।

যেহেতু পিউরিন বেস এবং পাইরিমিডিন বেসগুলি নিউক্লিক অ্যাসিডে সংযুক্ত দ্বিগুণ বন্ধন রয়েছে, তাই নিউক্লিক অ্যাসিডগুলিতে অতিবেগুনী শোষণের বৈশিষ্ট্য রয়েছে। ডিএনএ সোডিয়াম লবণের অতিবেগুনী শোষণ প্রায় 260nm, এবং এর শোষণকে A260 হিসাবে প্রকাশ করা হয়, এবং এটি 230nm এ শোষণ ট্রুতে থাকে, তাই অতিবেগুনী স্পেকট্রোস্কোপি ব্যবহার করা যেতে পারে। নিউক্লিক অ্যাসিড পরিমাণগত এবং গুণগতভাবে একটি লুমিনোমিটার দ্বারা নির্ধারিত হয়।

নিউক্লিক অ্যাসিড হল অ্যামফোলাইট, যা পলিঅ্যাসিডের সমতুল্য। নিউক্লিক অ্যাসিডগুলিকে নিরপেক্ষ বা ক্ষারীয় বাফার ব্যবহার করে অ্যানয়নে বিচ্ছিন্ন করা যেতে পারে এবং অ্যানোডের দিকে যাওয়ার জন্য একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রে স্থাপন করা যেতে পারে। এটি ইলেক্ট্রোফোরসিসের নীতি।

নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন কলাম নিষ্কাশন পদ্ধতি এবং নীতি

নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন নীতি এবং প্রয়োজনীয়তা

1. নিউক্লিক অ্যাসিড প্রাথমিক কাঠামোর অখণ্ডতা নিশ্চিত করুন

2. অন্যান্য অণুর দূষণ দূর করুন (যেমন DNA বের করার সময় RNA হস্তক্ষেপ বাদ দেওয়া)

3. নিউক্লিক অ্যাসিড নমুনাগুলিতে এনজাইমগুলিকে বাধা দেয় এমন কোনও জৈব দ্রাবক এবং ধাতব আয়নগুলির উচ্চ ঘনত্ব থাকা উচিত নয়

4. ম্যাক্রোমলিকুলার পদার্থ যেমন প্রোটিন, পলিস্যাকারাইড এবং লিপিড যতটা সম্ভব কমিয়ে দিন

নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন পদ্ধতি

1. ফেনল/ক্লোরোফর্ম নিষ্কাশন পদ্ধতি

এটি 1956 সালে উদ্ভাবিত হয়েছিল। ফেনল/ক্লোরোফর্ম দিয়ে কোষের ভাঙা তরল বা টিস্যু হোমোজেনেটের চিকিত্সা করার পরে, নিউক্লিক অ্যাসিড উপাদানগুলি, প্রধানত ডিএনএ, জলীয় পর্যায়ে দ্রবীভূত হয়, লিপিডগুলি প্রধানত জৈব পর্যায়ে থাকে এবং প্রোটিন দুটির মধ্যে অবস্থিত। পর্যায়

2. অ্যালকোহল বৃষ্টিপাত

ইথানল নিউক্লিক অ্যাসিডের হাইড্রেশন স্তরকে নির্মূল করতে পারে এবং নেতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত ফসফেট গ্রুপকে প্রকাশ করতে পারে এবং এনএ﹢ এর মতো ইতিবাচক চার্জযুক্ত আয়নগুলি ফসফেট গ্রুপের সাথে একত্রিত হয়ে একটি অবক্ষেপ তৈরি করতে পারে।

3. ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম পদ্ধতি

বিশেষ সিলিকা-ভিত্তিক শোষণ উপাদানের মাধ্যমে, ডিএনএ বিশেষভাবে শোষণ করা যেতে পারে, যখন আরএনএ এবং প্রোটিন মসৃণভাবে অতিক্রম করতে পারে, এবং তারপরে নিউক্লিক অ্যাসিডকে আবদ্ধ করতে উচ্চ লবণ এবং কম পিএইচ ব্যবহার করতে পারে এবং নিউক্লিককে পৃথক ও বিশুদ্ধ করতে কম লবণ এবং উচ্চ পিএইচ সহ ইলুট ব্যবহার করতে পারে। অ্যাসিড

4. থার্মাল ক্র্যাকিং ক্ষার পদ্ধতি

ক্ষারীয় নিষ্কাশন প্রধানত তাদের পৃথক করতে সমযোজী বন্ধ বৃত্তাকার প্লাজমিড এবং রৈখিক ক্রোমাটিনের মধ্যে টপোলজিক্যাল পার্থক্য ব্যবহার করে। ক্ষারীয় অবস্থার অধীনে, বিকৃত প্রোটিন দ্রবণীয় হয়।

5. ফুটন্ত পাইরোলাইসিস পদ্ধতি

ডিএনএ দ্রবণটি রৈখিক ডিএনএ অণুর বৈশিষ্ট্যগুলির সুবিধা গ্রহণের জন্য ডিএনএ টুকরোগুলিকে বিকৃত প্রোটিন এবং সেন্ট্রিফিউগেশনের মাধ্যমে কোষীয় ধ্বংসাবশেষ দ্বারা গঠিত অবক্ষেপ থেকে আলাদা করার জন্য তাপ-চিকিত্সা করা হয়।

6. ন্যানোম্যাগনেটিক জপমালা পদ্ধতি

ন্যানো প্রযুক্তি ব্যবহার করে সুপারপ্যারাম্যাগনেটিক ন্যানো পার্টিকেলগুলির পৃষ্ঠের উন্নতি এবং পরিবর্তন করতে, সুপারপ্যারাম্যাগনেটিক সিলিকন অক্সাইড ন্যানো-চুম্বকীয় জপমালা প্রস্তুত করা হয়। চৌম্বকীয় পুঁতিগুলি একটি মাইক্রোস্কোপিক ইন্টারফেসে নিউক্লিক অ্যাসিড অণুগুলিকে বিশেষভাবে চিনতে এবং দক্ষতার সাথে আবদ্ধ করতে পারে। সিলিকা ন্যানোস্ফিয়ারের সুপারপ্যারাম্যাগনেটিক বৈশিষ্ট্যগুলি ব্যবহার করে, ক্যাওট্রপিক লবণ (গুয়ানিডিন হাইড্রোক্লোরাইড, গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট ইত্যাদি) এবং একটি বাহ্যিক চৌম্বক ক্ষেত্র, ডিএনএ এবং আরএনএ রক্ত, প্রাণীর টিস্যু, খাদ্য, প্যাথোজেনিক অণুজীব এবং অন্যান্য নমুনা থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল।


পোস্টের সময়: মার্চ-18-2022
TOP