Разделянето и пречистването на протеини се използва широко в биохимичните изследвания и приложения и е важно оперативно умение. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument е събрала съдържанието на суровото разделяне и финото разделяне напротеинпречистване за всички. Типичната еукариотна клетка може да съдържа хиляди различни протеини, някои са много богати, а други съдържат само няколко копия. За да се изследва определен протеин, е необходимо първо да се пречисти протеинът от други протеини и непротеинови молекули.

Грубо разделяне

Когато се получи протеиновият екстракт (понякога смесен с нуклеинови киселини, полизахариди и др.), се избира набор от подходящи методи за отделяне на желанотопротеинот други примеси. Обикновено тази стъпка на разделяне използва методи като изсоляване, натрупване на изоелектрична точка и фракциониране на органичен разтворител. Тези методи се характеризират с простота и голям капацитет за обработка, който може да отстрани много примеси и да концентрира протеиновия разтвор. Някои протеинови екстракти са големи по обем и не са подходящи за концентриране чрез натрупване или изсоляване. Можете да изберете ултрафилтрация, гел филтрация, замразяване, вакуумно сушене или други методи за концентрация.

Фино разделяне

След грубото фракциониране на пробата, обемът обикновено е малък и повечето от примесите са отстранени. За по-нататъшно пречистване хроматографските методи обикновено включват гел филтрация, йонообменна хроматография, адсорбционна хроматография и афинитетна хроматография. Ако е необходимо, можете също да изберете електрофореза, включително зонова електрофореза, набор от изоелектрични точки и т.н. като окончателен процес на пречистване. Методът, използван за разделяне на ниво подразделение, обикновено е малък при планиране, но с висока разделителна способност.

Кристализацията е последният процес на разделяне и пречистване на протеини. Въпреки че процесът на кристализация не гарантира, че протеинът трябва да бъде еднороден, само когато определен протеин има предимство в разтвора, се образува кристал. Самият процес на кристализация е придружен от известна степен на пречистване, а прекристализацията може да отстрани малко количество фалшифициран протеин. Тъй като денатуриранпротеинникога не е бил открит по време на процеса на кристализация, кристализацията на протеина е не само знак за чистота, но и мощна насока за определяне, че продуктът е в естественото си състояние.