Методи и пречистване на пречистване на протеини

Методи напречистване на протеини:

Методът за пречистване на протеини, отделяне и пречистване на протеини, протеинът се освобождава от оригиналните клетки или тъкани в разтворено състояние и остава в първоначалното естествено състояние без загуба на биологична активност. Поради тази причина материалът трябва да отстранява животинска и мастна тъкан, семенният материал трябва дори да отлепи замърсяването на обвивката на семената от вещества като танини, а маслодайните семена трябва за предпочитане да използват органичен разтворител с ниска точка на кипене.

1. Методът за пречистване на протеини, размер и различни методи за анализ на разделяне: диализата и ултрафилтрацията използват тези протеини, за да преминат през природата на молекули, които не могат да преминат през полупропускливата мембрана; центрофугиране с градиент на плътност Качеството и плътността на протеина в средата ще имат по-голямо влияние върху частиците. Скоростта на утаяване е по-бърза; гел филтрацията е вид колонна хроматография.

2. Разделяне на разликата в разтворимостта при използване: електроутаяване, тъй като нетният заряд на протеиновите молекули е в нулева изоелектрична точка, намалявайки електростатичното отблъскване между молекулите, лесно агрегиране и минимална разтворимост; солен разтвор, използван със солен разтвор Концентрацията повишава или намалява разтворимостта на протеина.

3. Зарядът се разделя и анализира чрез различни методи, основното съдържание включва електрофореза и йонообменна хроматография.

4. Методи напречистване на протеиниСелективната адсорбция и разделяне на протеини използва силата на адсорбцията на частиците.

5. Афинитетната хроматография се основава на разделянето на лигандите. Тази биологична характеристика позволява на протеиновите молекули да се свързват специфично, а не ковалентно с друга молекула, наречена лиганд.

6. Метод за пречистване на протеин: Метод на утаяване с нискотемпературен органичен разтворител: Използвайте органични разтворители, които се смесват с вода, като метанол, етанол, за да намалите разтворимостта и утаяването на повечето протеини. Този метод е по-висок от разделителната способност на изсоляването, но протеинът денатурира повече. Когато е лесен, трябва да се направи при ниска температура.

6ca4b93f5

Как да пречистимпречистване на протеини:

Как да пречистите протеина, протеинът е голяма молекула и албумин с различни молекулни размери, има някои по-прости методи за разделяне на протеини и материали с малка молекула, както и отделена протеинова смес. Основните методи за разделяне на протеини с различни молекулни размери са диализа, ултрафилтрация, гел филтрация и центрофужно разделяне. Диализата и ултрафилтрацията обикновено се използват в методите за разделяне на протеини. Диализната смес, която трябва да се раздели, се поставя в диализна торба, направена от полупропусклива мембрана, и след това се потапя в диализния разтвор за разделяне. Ултрафилтрацията е процес на преминаване на вода и други малки молекули с помощта на центробежна сила или налягане в полупропусклива мембрана и улавяне на протеини в полупропускливата мембрана. Тези два метода могат да бъдат разделени от макромолекули на базата на протеини и малки молекули на базата на неорганична сол. Те често се изсоляват, използват се заедно с метода за разтваряне на сол или могат да бъдат въведени, за да извадят тези два метода след изсоляване с помощта на разтвори на неорганични соли.

1. Как да пречистите протеина чрез метода на изсоляване: Основата на метода на изсоляване е, че разтворимостта на протеина в разреден солев разтвор ще се увеличи с увеличаване на концентрацията на сол, но когато концентрацията на сол се увеличи до определена стойност, активността на водата ще се увеличи. Намаляване, което от своя страна може да накара някои протеини да генерират заряди през повърхността на молекулярната структура, за да бъдат постепенно неутрализирани и хидратиращата мембрана постепенно да се разруши, което в крайна сметка може да накара свързаните протеини и молекули да развият агломерация и утаяване от различни разтвори.

2. Метод на утаяване с органичен разтворител: Има две причини да се намали разтворимостта на протеина в органични разтворители: как да се пречисти протеина като солев разтвор с дехидратация; второ, диелектричната константа на органичните разтворители от водата може да бъде намалена в полярни разтворители.

3. Протеинов утаяващ агент: протеинът като утаяващ агент действа само върху един или един вид протеиново утаяване, често срещаните са алкални, протеинови, лектинови и тежки метали.

4. Утаяване на полиетилен гликол: Как да пречистите водоразтворимите нейонни полимери запречистване на протеини, като полиетилен гликол и натриев декстран сулфат за утаяване на протеини.


Време на публикуване: 27 октомври 2020 г