SPE існуе дзесяцігоддзямі, і нездарма. Калі навукоўцы хочуць выдаліць фонавыя кампаненты са сваіх узораў, яны сутыкаюцца з праблемай зрабіць гэта без зніжэння сваёй здольнасці дакладна і дакладна вызначыць наяўнасць і колькасць злучэння, якое іх цікавіць. SPE - адзін з метадаў, які навукоўцы часта выкарыстоўваюць, каб дапамагчы падрыхтаваць свае ўзоры для адчувальных прыбораў, якія выкарыстоўваюцца для колькаснага аналізу. SPE надзейны, працуе для шырокага спектру тыпаў узораў, і новыя прадукты і метады SPE працягваюць распрацоўвацца. У аснове распрацоўкі гэтых метадаў ляжыць разуменне таго, што, нягледзячы на ​​тое, што слова «храматаграфія» не сустракаецца ў назве методыкі, SPE, тым не менш, з'яўляецца формай храматаграфічнага падзелу.

SPE: Ціхая храматаграфія

Ёсць старая прымаўка: «Калі дрэва падае ў лесе, і нікога няма, каб гэта пачуць, яно ўсё яшчэ выдае гук?» Гэтая прымаўка нагадвае нам SPE. Гэта можа здацца дзіўным, але калі мы думаем пра SPE, узнікае пытанне: "Калі адбываецца аддзяленне і няма дэтэктара, які б гэта зафіксаваў, ці адбылася храматаграфія?" У выпадку SPE адказ - рашучае "так!" Пры распрацоўцы або ліквідацыі непаладак метаду SPE можа быць вельмі карысна памятаць, што SPE - гэта проста храматаграфія без храматаграмы. Калі задумацца, хіба Міхаіл Цвет, якога называюць «бацькам храматаграфіі», не займаўся тым, што мы сёння назвалі б «SPE»? Калі ён падзяліў свае сумесі раслінных пігментаў, дазволіўшы сіле цяжару перанесці іх, раствораныя ў растваральніку, праз пласт здробненага мелу, ці моцна гэта адрознівалася ад сучаснага метаду SPE?

Разуменне вашага ўзору

Паколькі ТФЭ заснавана на храматаграфічных прынцыпах, у аснове кожнага добрага метаду ТФЭ ляжыць ўзаемасувязь паміж аналітамі, матрыцай, нерухомай фазай (сарбент ТФЭ) і рухомай фазай (растваральнікі, якія выкарыстоўваюцца для прамывання або элюіравання ўзору). .

Разуменне характару вашага ўзору, наколькі гэта магчыма, - лепшы пачатак, калі вам трэба распрацаваць або ліквідаваць непаладкі метаду SPE. Каб пазбегнуць непатрэбных спроб і памылак падчас распрацоўкі метаду, апісанне фізічных і хімічных уласцівасцей як аналізаваных рэчываў, так і матрыцы вельмі карысна. Калі вы даведаецеся пра свой узор, вы зможаце супаставіць яго з адпаведным прадуктам SPE. Напрыклад, веданне адноснай палярнасці аналітаў у параўнанні адзін з адным і матрыцай можа дапамагчы вам вырашыць, ці з'яўляецца правільным падыходам выкарыстанне палярнасці для аддзялення аналітаў ад матрыцы. Веданне таго, ці з'яўляюцца вашы аналіты нейтральнымі або могуць існаваць у зараджаных станах, таксама можа дапамагчы вам накіраваць вас да прадуктаў SPE, якія спецыялізуюцца на захаванні або элюіраванні нейтральных, станоўча або адмоўна зараджаных відаў. Гэтыя дзве канцэпцыі прадстаўляюць дзве найбольш часта выкарыстоўваюцца ўласцівасці аналіту, якія трэба выкарыстоўваць пры распрацоўцы метадаў ТФЭ і выбары прадуктаў ТФЭ. Калі вы можаце апісаць свае аналіты і важныя кампаненты матрыцы ў гэтых тэрмінах, вы на шляху да выбару добрага кірунку для распрацоўкі вашага метаду SPE.

Падзел па сваяцтву

Прынцыпы, якія вызначаюць падзелы, якія адбываюцца ў калонцы LC, напрыклад, дзейнічаюць у падзеле SPE. Асновай любога храматаграфічнага падзелу з'яўляецца стварэнне сістэмы, якая мае розную ступень узаемадзеяння паміж кампанентамі ўзору і дзвюма фазамі, прысутнымі ў калоне або картрыджы SPE, рухомай фазай і нерухомай фазай.

Адзін з першых крокаў да таго, каб адчуваць сябе камфортна пры распрацоўцы метаду SPE, - гэта знаёмства з двума тыпамі ўзаемадзеяння, якія найбольш часта сустракаюцца пры падзеле SPE: палярнасць і/або стан зарада.

Палярнасць

Калі вы збіраецеся выкарыстоўваць палярнасць для ачысткі ўзору, адзін з першых варыянтаў, які вы павінны зрабіць, гэта вырашыць, які «рэжым» лепшы. Лепш за ўсё працаваць з адносна палярным асяроддзем SPE і адносна непалярнай рухомай фазай (г.зн. звычайным рэжымам) або, наадварот, з адносна непалярным асяроддзем SPE у спалучэнні з адносна палярнай рухомай фазай (г.зн. зваротным рэжымам, названым так проста таму, што ён супрацьлеглы першапачаткова ўсталяванага «нармальнага рэжыму»).

Вывучаючы прадукты SPE, вы ўбачыце, што фазы SPE існуюць у розных палярнасцях. Больш за тое, выбар растваральніка рухомай фазы таксама прапануе шырокі дыяпазон палярнасцей, які часта можна рэгуляваць з дапамогай сумесяў растваральнікаў, буфераў або іншых дадаткаў. Пры выкарыстанні адрозненняў у палярнасці ў якасці ключавой характарыстыкі для аддзялення аналітаў ад умяшанняў матрыцы (або адзін ад аднаго) магчыма вялікая ступень тонкасці.

Проста майце на ўвазе старую хімічную прымаўку "падобнае раствараецца падобным", калі вы разглядаеце палярнасць у якасці фактару падзелу. Чым больш злучэнне падобна да палярнасці рухомай або нерухомай фазы, тым больш верагоднасць яго ўзаемадзеяння мацней. Мацнейшае ўзаемадзеянне са стацыянарнай фазай прыводзіць да больш працяглага ўтрымання ў асяроддзі SPE. Моцнае ўзаемадзеянне з рухомай фазай прыводзіць да меншага ўтрымання і больш ранняга вымывання.

Дзяржава зарада

Калі аналіты, якія цікавяць, альбо заўсёды існуюць у зараджаным стане, альбо могуць быць пераведзены ў зараджаны стан з дапамогай умоў раствора, у якім яны раствораны (напрыклад, pH), то існуе іншы магутны сродак аддзялення іх ад матрыцы (або кожнага іншае) праз выкарыстанне носьбітаў SPE, якія могуць прыцягнуць іх уласным зарадам.

У гэтым выпадку прымяняюцца класічныя правілы электрастатычнага прыцягнення. У адрозненне ад падзелаў, якія абапіраюцца на характарыстыкі палярнасці і мадэль узаемадзеянняў "падобнае раствараецца ў падобным", узаемадзеянне ў зараджаным стане дзейнічае па правіле "супрацьлегласці прыцягваюцца". Напрыклад, у вас можа быць асяроддзе SPE, якое мае станоўчы зарад на сваёй паверхні. Каб збалансаваць гэтую станоўча зараджаную паверхню, звычайна з ёй першапачаткова звязаны адмоўна зараджаны від (аніён). Калі ваш аналіт з адмоўным зарадам уводзіцца ў сістэму, ён мае магчымасць выцясняць першапачаткова звязаны аніён і ўзаемадзейнічаць з станоўча зараджанай паверхняй SPE. Гэта прыводзіць да захавання аналіту на фазе SPE. Такая замена аніёнаў называецца «аніённы абмен» і з'яўляецца толькі адным з прыкладаў больш шырокай катэгорыі прадуктаў SPE «іённага абмену». У гэтым прыкладзе станоўча зараджаныя віды будуць мець моцны стымул заставацца ў рухомай фазе і не ўзаемадзейнічаць з станоўча зараджанай паверхняй SPE, таму яны не будуць захоўвацца. І, калі б паверхня SPE не мела іншых характарыстык у дадатак да іонаабменных уласцівасцей, нейтральныя разнавіднасці таксама будуць мінімальна захоўвацца (хаця такія змешаныя прадукты SPE існуюць, што дазваляе выкарыстоўваць механізмы іённага абмену і ўтрымання зваротнай фазы ў тым жа асяроддзі SPE ).

Важным адрозненнем, якое трэба мець на ўвазе пры выкарыстанні механізмаў іённага абмену, з'яўляецца прырода зарадавага стану аналіту. Калі аналіт заўсёды зараджаны, незалежна ад pH раствора, у якім ён знаходзіцца, ён лічыцца "моцным" відам. Калі аналіт зараджаецца толькі пры пэўных умовах pH, ён лічыцца "слабым" відам. Гэта важная характарыстыка вашых аналітаў, таму што яна будзе вызначаць, які тып носьбіта SPE выкарыстоўваць. У агульных рысах тут дапаможа разважанне пра супрацьлегласці, якія ідуць разам. Рэкамендуецца спалучаць слабы іонаабменны SPE сарбент з «моцным» відам і моцны іонаабменны сарбент са «слабым» аналітам.