Təmizləmə üsulu nədirprotein təmizləmə sistemi? Təmizlənmiş zülalın kodlaşdırıcı DNT ardıcıllığını bilmək, hədəf gendə hansı hüceyrə və ya toxumaların həddindən artıq ifadə olunduğunu görmək və hədəf DNT fraqmentinin arfını gücləndirmək üçün gen primerlərinin layihələndirilməsi lazımdır. Bu, hədəf gen fraqmentlərinin əldə edilməsi adlanır.

İfadə vektorunun qurulması: Alınan gen ifadəsinin özünün xüsusiyyətləri ilə prokaryotik və ya eukaryotik ifadə vektorunda bu addımın əsas problemi plazmid və maraq doğuran geni və ifadə sistemini qurmaqdır. Prokaryotik ifadə müddəti qısadır, dəyəri azdır və böyük miqdarda ifadə prioritetdir; gen E. coli-də ifadə olunmur və problem kodon optimallaşdırılmasında baş verir. Daha yaxşı aktivlik və zülalın təmizlənməsini nəzərə alaraq, tədqiqatçılar Pichi mayasında ifadə etməyi seçdilər. Kodon optimallaşdırılmasının uğurlu ifadəsi vacibdir.

Zülal təmizləmə sisteminin təmizlənməsi üsulu nədir:

1. Yağış.

2. Elektroforez: Yüklü zülal öz izoelektrik nöqtəsindən yüksək və ya aşağıdır və elektrik sahəsində elektrik sahəsinin mənfi elektroduna və ya müsbət elektroduna köçürülə bilər. Dəstək film elektroforezi, elektroforez və s.

3. Dializ: Böyük molekulları zülallardan və kiçik molekulyar üzvi birləşmələrdən ayırmaq üçün iki dializ torbasından istifadə edən üsul.

4. Xromatoqrafiya: İon mübadiləsi xromatoqrafiyası zülalların sərbəst xüsusiyyətlərindən istifadə edir. Müəyyən bir pH altında zülalların yükləri və xassələri fərqlidir və onları ion mübadiləsi xromatoqrafiyası ilə ayırmaq olar. Anion mübadiləsi xromatoqrafiyasında ilk növbədə aşağı mənfi gücə malik zülallar süzülür. Gel filtrasiyası kimi də tanınan molekulyar ələklər. Kiçik zülallar məsamələrə daxil olur və uzun müddət orada qalır. Böyük zülallar məsamələrə daxil ola bilmir və birbaşa xaricə axır.

5. Təmizləmə üsulu nədirprotein təmizləmə sistemi? Ultrasentrifuqa: Zülalın təmizlənməsi molekulyar çəkisini təyin etmək üçün istifadə edilə bilər və zülal kimi istifadə edilə bilər. Müxtəlif sıxlıqlara malik zülalların əmələ gəlməsi ayrılır.