Zülalların ayrılması və təmizlənməsi biokimya tədqiqatlarında və tətbiqində geniş istifadə olunur və mühüm əməliyyat bacarığıdır. SCG Protein Təmizləmə Sistemi Şirkəti-Saipu Aləti məhsulun xam ayrılması və incə ayrılma tərkibini tərtib etmişdir.proteinhər kəs üçün təmizlik. Tipik bir eukaryotik hüceyrədə minlərlə müxtəlif zülal ola bilər, bəziləri çox zəngindir, bəziləri isə yalnız bir neçə nüsxədən ibarətdir. Müəyyən bir zülalı öyrənmək üçün əvvəlcə zülalı digər zülallardan və zülal olmayan molekullardan təmizləmək lazımdır.

Kobud ayrılma

Zülal ekstraktı (bəzən nuklein turşuları, polisaxaridlər və s. ilə qarışdırılır) əldə edildikdə, istədiyinizi ayırmaq üçün uyğun üsullar dəsti seçilir.proteindigər çirklərdən. Ümumiyyətlə, bu ayırma mərhələsi duzlama, izoelektrik nöqtələrin yığılması və üzvi həlledicilərin fraksiyalaşdırılması kimi üsullardan istifadə edir. Bu üsullar sadəlik və böyük emal qabiliyyəti ilə xarakterizə olunur ki, bu da bir çox çirkləri çıxara və zülal məhlulunu cəmləşdirə bilər. Bəzi zülal ekstraktları həcmcə böyükdür və yığılaraq və ya duzlanaraq konsentrasiya üçün uyğun deyil. Konsentrasiya üçün ultrafiltrasiya, gel filtrasiyası, dondurucu vakuum qurutma və ya digər üsulları seçə bilərsiniz.

İncə ayrılma

Nümunənin kobud fraksiyalaşdırılmasından sonra həcm ümumiyyətlə kiçik olur və çirklərin çoxu çıxarılır. Əlavə təmizləmə üçün xromatoqrafiya üsullarına ümumiyyətlə gel filtrasiyası, ion mübadiləsi xromatoqrafiyası, adsorbsiya xromatoqrafiyası və yaxınlıq xromatoqrafiyası daxildir. Lazım gələrsə, son təmizləmə prosesi kimi elektroforez, o cümlədən zona elektroforezi, izoelektrik nöqtə dəsti və s. seçə bilərsiniz. Bölmə səviyyəsinin ayrılması üçün istifadə olunan üsul planlaşdırmada ümumiyyətlə kiçikdir, lakin yüksək qətnamə ilə.

Kristallaşma zülalların ayrılması və təmizlənməsinin son prosesidir. Kristallaşma prosesi zülalın vahid olmasını təmin etməsə də, yalnız müəyyən bir zülalın kristal əmələ gətirmək üçün məhlulda üstünlüyü olduqda olur. Kristallaşma prosesinin özü müəyyən dərəcədə təmizlənmə ilə müşayiət olunur və yenidən kristallaşma az miqdarda saxtalaşdırılmış proteini çıxara bilər. Denatürasiya olunduğundanproteinkristallaşma prosesində heç vaxt aşkar edilməmişdir, zülalın kristallaşması yalnız saflıq əlaməti deyil, həm də məhsulun təbii vəziyyətdə olduğunu müəyyən etmək üçün güclü bir təlimatdır.