Nuklein turşusu dezoksiribonuklein turşusu (DNT) və ribonuklein turşusuna (RNT) bölünür, bunlar arasında RNT müxtəlif funksiyalarına görə ribosomal RNT (rRNT), messenger RNT (mRNT) və transfer RNT (tRNA) bölünə bilər.

DNT əsasən nüvədə, mitoxondriyada və xloroplastlarda, RNT isə əsasən sitoplazmada cəmləşmişdir.

Purin əsasları və pirimidin əsasları nuklein turşularında birləşmiş qoşa bağlara malik olduğundan, nuklein turşuları ultrabənövşəyi udma xüsusiyyətlərinə malikdir. DNT natrium duzlarının ultrabənövşəyi udulması təxminən 260nm-dir və onun udma qabiliyyəti A260 kimi ifadə edilir və 230nm-də udma çuxurundadır, buna görə də ultrabənövşəyi spektroskopiyadan istifadə edilə bilər. Nuklein turşuları kəmiyyət və keyfiyyətcə luminometrlə müəyyən edilir.

Nuklein turşuları politurşulara ekvivalent olan amfolitlərdir. Nuklein turşuları neytral və ya qələvi tamponlardan istifadə etməklə anionlara parçalana və anoda doğru hərəkət etmək üçün elektrik sahəsinə yerləşdirilə bilər. Bu elektroforez prinsipidir.

Nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənməsi prinsipləri və tələbləri

1. Nuklein turşusunun ilkin strukturunun bütövlüyünü təmin edin

2. Digər molekulların çirklənməsini aradan qaldırın (məsələn, DNT çıxararkən RNT müdaxiləsini istisna etmək)

3. Nuklein turşusu nümunələrində fermentləri maneə törədən üzvi həlledicilər və yüksək konsentrasiyalı metal ionları olmamalıdır.

4. Zülallar, polisaxaridlər və lipidlər kimi makromolekulyar maddələri mümkün qədər azaldın.

Nuklein turşusunun çıxarılması və təmizlənməsi üsulu

1. Fenol/xloroformun çıxarılması üsulu

1956-cı ildə icad edilmişdir. Hüceyrənin parçalanmış mayesini və ya toxuma homogenatını fenol/xloroformla müalicə etdikdən sonra nuklein turşusu komponentləri, əsasən DNT sulu fazada həll olunur, lipidlər əsasən üzvi fazada, zülallar isə ikisinin arasında yerləşir. mərhələləri.

2. Alkoqolun çökməsi

Etanol nuklein turşusunun nəmləndirici qatını aradan qaldıra və mənfi yüklü fosfat qrupunu ifşa edə bilər və NA﹢ kimi müsbət yüklü ionlar fosfat qrupu ilə birləşərək çöküntü əmələ gətirə bilər.

3. Xromatoqrafik sütun üsulu

Xüsusi silisium əsaslı adsorbsiya materialı vasitəsilə DNT xüsusi adsorbsiya oluna bilər, RNT və zülal isə rəvan şəkildə keçə bilər, sonra nuklein turşusunu bağlamaq üçün yüksək duz və aşağı pH istifadə edə bilər və nukleini ayırmaq və təmizləmək üçün aşağı duz və yüksək pH ilə elute edə bilər. turşu.

4. Termik krekinq qələvi üsulu

Qələvi ekstraksiya əsasən onları ayırmaq üçün kovalent qapalı dairəvi plazmidlər və xətti xromatin arasındakı topoloji fərqlərdən istifadə edir. Qələvi şəraitdə denatürləşdirilmiş zülallar həll olur.

5. Qaynatma piroliz üsulu

DNT məhlulu, sentrifuqa yolu ilə denatürləşdirilmiş zülallar və hüceyrə zibilləri ilə əmələ gələn çöküntüdən DNT fraqmentlərini ayırmaq üçün xətti DNT molekullarının xüsusiyyətlərindən istifadə etmək üçün istiliklə müalicə olunur.

6. Nanomaqnit muncuqlar üsulu

Superparamaqnit nanohissəciklərin səthini təkmilləşdirmək və modifikasiya etmək üçün nanotexnologiyadan istifadə edərək, superparamaqnit silisium oksidi nano-maqnit muncuqları hazırlanır. Maqnit muncuqları xüsusi olaraq mikroskopik interfeysdə nuklein turşusu molekullarını tanıya və onlara effektiv şəkildə bağlana bilər. Silisium nanosferlərinin superparamaqnit xüsusiyyətlərindən istifadə edərək, xaotrop duzların (quanidin hidroxlorid, guanidin izotiosiyanat və s.) və xarici maqnit sahəsinin təsiri altında qandan, heyvan toxumasından, qidadan, patogen mikroorqanizmlərdən və digər nümunələrdən DNT və RNT təcrid edilmişdir.