üsullarıprotein təmizlənməsi:

Zülalın təmizlənməsi, ayrılması və zülalın təmizlənməsi üsulu, zülal ilkin hüceyrələrdən və ya toxumalardan həll olunmuş halda ayrılır və bioloji aktivliyini itirmədən orijinal təbii vəziyyətdə qalır. Bu səbəbdən material heyvan və piy toxumasını çıxarmalı, toxum materialı hətta tanin kimi maddələrdən toxum qabığının çirklənməsini soymalı və yağlı toxum tercihen az qaynayan üzvi həlledicidən istifadə etməlidir.

1. Zülalın təmizlənməsi üsulu, ölçüsü və müxtəlif ayrılması təhlili üsulları: dializ və ultrafiltrasiya bu zülalları yarıkeçirici membrandan keçə bilməyən molekulların təbiətindən keçmək üçün istifadə edir; sıxlıq qradiyenti sentrifuqasiyası Mühitdəki zülalın keyfiyyəti və sıxlığı hissəciklərə daha çox təsir edəcək. Yerləşdirmə sürəti daha sürətlidir; gel filtrasiyası bir növ sütun xromatoqrafiyasıdır.

2. İstifadədə həllolma fərqinin ayrılması: zülal molekullarının xalis yükü sıfır izoelektrik nöqtədə olduğu üçün elektroçökmə, molekullar arasında elektrostatik itələməni azaltmaq, toplamaq asan və minimum həllolma; duz məhlulu ilə istifadə edilən duz məhlulu Konsentrasiya zülalın həllolma qabiliyyətini artırır və ya azaldır.

3. Yük müxtəlif üsullarla ayrılır və təhlil edilir, əsas məzmunlara elektroforez və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası daxildir.

4. Metodlarprotein təmizlənməsiZülalların seçici adsorbsiya və ayrılması hissəcik adsorbsiyasının gücündən istifadə edir.

5. Yaxınlıq xromatoqrafiyası liqandların ayrılmasına əsaslanır. Bu bioloji xüsusiyyət zülal molekullarının liqand adlanan başqa bir molekula kovalent deyil, xüsusi olaraq bağlanmasına imkan verir.

6. Zülalın təmizlənməsi üsulu: Aşağı temperaturda üzvi həlledicinin çökdürülməsi üsulu: Əksər zülalların həll olunma qabiliyyətini və çökmə qabiliyyətini azaltmaq üçün metanol, etanol kimi su ilə qarışan üzvi həlledicilərdən istifadə edin. Bu üsul duzlama həllindən daha yüksəkdir, lakin zülal daha çox denatürasiya edir Asan olduqda, aşağı temperaturda edilməlidir.

Necə təmizləmək olarprotein təmizlənməsi:

Zülalları necə təmizləmək olar, zülal böyük bir molekuldur və müxtəlif molekulyar ölçülərdə albumin, zülal və kiçik molekullu materialları, həmçinin ayrılmış protein qarışığını ayırmaq üçün daha sadə üsullar var. Müxtəlif molekulyar ölçülü zülalların ayrılması üçün əsas üsullar dializ, ultrafiltrasiya, gel filtrasiyası və mərkəzdənqaçma ayırmadır. Zülalların ayrılması üsullarında dializ və ultrafiltrasiyadan geniş istifadə olunur. Ayrılacaq dializ qarışığı yarımkeçirici membrandan hazırlanmış dializ torbasına qoyulur, sonra isə ayırmaq üçün dializ məhluluna batırılır. Ultrafiltrasiya yarımkeçirici membranda mərkəzdənqaçma qüvvəsi və ya təzyiqdən istifadə edərək suyun və digər kiçik molekulların keçməsi və zülalların yarıkeçirici membranda tutulması prosesidir. Bu iki üsul zülal əsaslı makromolekullardan və qeyri-üzvi duz əsaslı kiçik molekullardan ayrıla bilər. Onlar tez-tez duzlanır, duzun həlli üsulu ilə birlikdə istifadə olunur və ya qeyri-üzvi duz məhlullarından istifadə edərək duzlandıqdan sonra bu iki üsulu çıxarmaq üçün tətbiq oluna bilər.

1. Duzlama üsulu ilə zülalı necə təmizləmək olar: Duzlama metodunun əsası ondan ibarətdir ki, zülalın seyreltilmiş duz məhlulunda həll olunma qabiliyyəti duz konsentrasiyasının artması ilə artacaq, lakin duz konsentrasiyası müəyyən bir dəyərə yüksəldikdə, su aktivliyi artacaq. Azalma, bu da öz növbəsində bəzi zülalların molekulyar struktur səthi vasitəsilə yüklərin əmələ gəlməsinə səbəb ola bilər, tədricən neytrallaşdırılır və nəmləndirici membran tədricən məhv edilir, nəticədə əlaqəli zülalların və molekulların yığılmasına və müxtəlif məhlullardan çökməsinə səbəb ola bilər.

2. Üzvi həlledici ilə çökdürmə üsulu: Zülalın üzvi həlledicilərdə həllini azaltmaq üçün iki səbəb var: zülalın susuzlaşdırma ilə duz məhlulu kimi necə təmizlənməsi; ikincisi, üzvi həlledicilərin sudan dielektrik keçiriciliyi polar həlledicilərdə azaldıla bilər.

3. Protein çökdürən agent: zülal çöküntü agenti olaraq yalnız bir növ və ya bir protein çökdürməsinə təsir göstərir, ümumi olanlar qələvi, zülal, lektin və ağır metallardır.

4. Polietilen qlikol yağıntısı: suda həll olunan qeyri-ion polimerləri necə təmizləmək olarprotein təmizlənməsizülalları çökdürmək üçün polietilen qlikol və natrium dekstran sulfat kimi.