ما هي طريقة تنقيةنظام تنقية البروتين؟ من الضروري معرفة تسلسل الحمض النووي المشفر للبروتين المنقى، لمعرفة الخلايا أو الأنسجة التي يتم التعبير عنها بشكل مفرط في الجين المستهدف، وتصميم بادئات جينية لتضخيم نطاق جزء الحمض النووي المستهدف. وهذا ما يسمى بالحصول على أجزاء الجينات المستهدفة.
بناء ناقل التعبير: في ناقل التعبير بدائيات النواة أو حقيقيات النواة مع خصائص التعبير الجيني الذي تم الحصول عليه نفسه، تتمثل المشكلة الرئيسية في هذه الخطوة في بناء البلازميد والجين محل الاهتمام ونظام التعبير. وقت التعبير بدائيات النواة قصير، والتكلفة منخفضة، وكمية كبيرة من التعبير هي الأولوية؛ لا يتم التعبير عن الجين في الإشريكية القولونية، وتحدث المشكلة في تحسين الكودون. ونظرًا لنشاط أفضل وتنقية البروتين، اختار الباحثون التعبير عنه في خميرة البيتشي. يعد التعبير الناجح عن تحسين الكودون أمرًا مهمًا.
ما هي طريقة تنقية نظام تنقية البروتين:
1. هطول الأمطار.
2. الرحلان الكهربي: يكون البروتين المشحون أعلى أو أقل من نقطة تساوي الجهد الكهربي ويمكن نقله إلى القطب السالب أو القطب الموجب للمجال الكهربائي في المجال الكهربائي. دعم الرحلان الكهربائي للفيلم، الرحلان الكهربائي، إلخ.
3. غسيل الكلى: طريقة تستخدم كيسين لغسيل الكلى لفصل الجزيئات الكبيرة عن البروتينات والمركبات العضوية الجزيئية الصغيرة.
4. اللوني: يستخدم كروماتوغرافيا التبادل الأيوني الخصائص الحرة للبروتينات. تحت درجة حموضة محددة، تختلف شحنات وخصائص البروتينات، ويمكن فصلها عن طريق كروماتوغرافيا التبادل الأيوني. في كروماتوغرافيا التبادل الأنيوني، تتم إزالة البروتينات ذات الطاقة السلبية المنخفضة أولاً. المناخل الجزيئية، والمعروفة أيضًا باسم الترشيح الهلامي. تدخل البروتينات الصغيرة إلى المسام وتبقى فيها لفترة طويلة. لا يمكن للبروتينات الكبيرة أن تدخل المسام وتتدفق مباشرة.
5. ما هي طريقة تنقيةنظام تنقية البروتين؟ الطرد المركزي الفائق: يمكن استخدام تنقية البروتين لتحديد الوزن الجزيئي ويمكن استخدامه كبروتين. يتم فصل تكوين البروتينات ذات الكثافات المختلفة.
وقت النشر: 21 أبريل 2021