يُستخدم فصل البروتينات وتنقيتها على نطاق واسع في أبحاث وتطبيقات الكيمياء الحيوية، وهي مهارة تشغيلية مهمة. قامت شركة SCG لتنقية البروتين - Saipu Instrument بتجميع محتوى الفصل الخام ومحتوى الفصل الدقيقبروتينالتطهير للجميع. يمكن أن تحتوي الخلية حقيقية النواة النموذجية على آلاف البروتينات المختلفة، بعضها غني جدًا والبعض الآخر يحتوي على نسخ قليلة فقط. من أجل دراسة بروتين معين، من الضروري أولاً تنقية البروتين من البروتينات الأخرى والجزيئات غير البروتينية.

الانفصال الخشن

عندما يتم الحصول على مستخلص البروتين (أحيانًا ممزوجًا بالأحماض النووية والسكريات وغيرها)، يتم اختيار مجموعة من الطرق المناسبة لفصل المواد المرغوبة.بروتينمن الشوائب الأخرى. بشكل عام، تستخدم خطوة الفصل هذه طرقًا مثل التمليح، وتراكم نقطة الجهد الكهربي، وتجزئة المذيبات العضوية. تتميز هذه الطرق بالبساطة وقدرة المعالجة الكبيرة، والتي يمكنها إزالة العديد من الشوائب وتركيز محلول البروتين. بعض مستخلصات البروتين كبيرة الحجم ولا تصلح للتركيز بالتراكم أو التمليح. يمكنك اختيار الترشيح الفائق، أو الترشيح الهلامي، أو التجفيف بالفراغ بالتجميد، أو طرق أخرى للتركيز.

الانفصال الدقيق

بعد التجزئة التقريبية للعينة، يكون الحجم صغيرًا بشكل عام، ويتم إزالة معظم الشوائب. لمزيد من التنقية، تتضمن طرق التحليل الكروماتوجرافي عمومًا ترشيح الهلام، وكروماتوجرافيا التبادل الأيوني، وكروماتوجرافيا الامتزاز، وكروماتوجرافيا الألفة. إذا لزم الأمر، يمكنك أيضًا اختيار الرحلان الكهربي، بما في ذلك الرحلان الكهربي للمنطقة، ومجموعة النقاط الكهربية، وما إلى ذلك كعملية تنقية نهائية. الطريقة المستخدمة لفصل مستوى التقسيم الفرعي تكون صغيرة بشكل عام في التخطيط، ولكنها ذات دقة عالية.

التبلور هو العملية النهائية لفصل البروتين وتنقيته. على الرغم من أن عملية التبلور لا تضمن أن يكون البروتين موحدًا، إلا أنه يتم ذلك فقط عندما يكون لبروتين معين ميزة في المحلول لتشكيل بلورة. عملية التبلور نفسها تكون مصحوبة بدرجة معينة من التنقية، وإعادة التبلور يمكن أن تزيل كمية صغيرة من البروتين المغشوش. منذ التشويهبروتينلم يتم العثور عليه مطلقًا أثناء عملية التبلور، فإن تبلور البروتين ليس فقط علامة على النقاء، ولكنه أيضًا دليل إرشادي قوي لتحديد أن المنتج في حالته الطبيعية.