ينقسم الحمض النووي إلى حمض ديوكسي ريبونوكلييك (DNA) وحمض ريبونوكلييك (RNA)، ومن بينها يمكن تقسيم الحمض النووي الريبي (RNA) إلى RNA الريباسي (rRNA)، وRNA المرسال (mRNA)، ونقل RNA (tRNA) وفقًا لوظائف مختلفة.

ويتركز الحمض النووي بشكل رئيسي في النواة والميتوكوندريا والبلاستيدات الخضراء، في حين يتم توزيع الحمض النووي الريبي بشكل رئيسي في السيتوبلازم.

نظرًا لأن قواعد البيورين وقواعد البيريميدين لها روابط مزدوجة مترافقة في الأحماض النووية، فإن الأحماض النووية لها خصائص امتصاص الأشعة فوق البنفسجية. يبلغ امتصاص أملاح صوديوم الحمض النووي للأشعة فوق البنفسجية حوالي 260 نانومتر، ويتم التعبير عن امتصاصه بـ A260، ويكون عند حوض الامتصاص عند 230 نانومتر، لذلك يمكن استخدام التحليل الطيفي للأشعة فوق البنفسجية. يتم تحديد الأحماض النووية كميا ونوعيا بواسطة مقياس الإضاءة.

الأحماض النووية هي الأمفوليتات، والتي تعادل الأحماض المتعددة. يمكن فصل الأحماض النووية إلى أنيونات باستخدام مخازن محايدة أو قلوية، ووضعها في مجال كهربائي للتحرك نحو القطب الموجب. هذا هو مبدأ الكهربائي.

مبادئ ومتطلبات استخلاص الحمض النووي وتنقيته

1. التأكد من سلامة البنية الأولية للحمض النووي

2. القضاء على تلوث الجزيئات الأخرى (مثل استبعاد تدخل الحمض النووي الريبي (RNA) عند استخراج الحمض النووي)

3. يجب ألا يكون هناك مذيبات عضوية وتركيزات عالية من الأيونات المعدنية التي تمنع الإنزيمات في عينات الحمض النووي

4. تقليل المواد الجزيئية مثل البروتينات والسكريات والدهون قدر الإمكان

طريقة استخلاص الحمض النووي وتنقيته

1. طريقة استخلاص الفينول/الكلوروفورم

تم اختراعه في عام 1956. بعد معالجة السائل المتكسر أو الأنسجة المتجانسة بالفينول/الكلوروفورم، تذوب مكونات الحمض النووي، وخاصة الحمض النووي، في الطور المائي، وتكون الدهون بشكل رئيسي في الطور العضوي، وتقع البروتينات بين الطورين. مراحل.

2. هطول الكحول

يمكن للإيثانول إزالة طبقة الماء من الحمض النووي وكشف مجموعة الفوسفات سالبة الشحنة، ويمكن للأيونات الموجبة الشحنة مثل NA﹢ أن تتحد مع مجموعة الفوسفات لتكوين راسب.

3. طريقة العمود الكروماتوغرافي

من خلال مادة الامتزاز الخاصة القائمة على السيليكا، يمكن امتصاص الحمض النووي على وجه التحديد، في حين يمكن للحمض النووي الريبي (RNA) والبروتين المرور بسلاسة، ثم استخدام الملح العالي ودرجة الحموضة المنخفضة لربط الحمض النووي، والإزالة باستخدام ملح منخفض ودرجة حموضة عالية لفصل وتنقية الحمض النووي. حامض.

4. طريقة التكسير القلوي الحراري

يستخدم الاستخلاص القلوي بشكل أساسي الاختلافات الطوبولوجية بين البلازميدات الدائرية المغلقة تساهميًا والكروماتين الخطي لفصلهما. في ظل الظروف القلوية، تكون البروتينات المشوهة قابلة للذوبان.

5. طريقة الغليان الانحلال الحراري

تتم معالجة محلول الحمض النووي بالحرارة للاستفادة من خصائص جزيئات الحمض النووي الخطية لفصل شظايا الحمض النووي عن الراسب الذي يتكون من البروتينات المشوهة والحطام الخلوي عن طريق الطرد المركزي.

6. طريقة الخرز النانوي المغناطيسي

باستخدام تكنولوجيا النانو لتحسين وتعديل سطح الجسيمات النانوية فائقة المغنطيسية، يتم تحضير خرزات نانوية مغناطيسية من أكسيد السيليكون فائقة المغنطيسية. يمكن للخرزات المغناطيسية أن تتعرف بشكل خاص على جزيئات الحمض النووي وترتبط بها بكفاءة على واجهة مجهرية. باستخدام الخواص المغناطيسية الفائقة لكرات السيليكا النانوية، تحت تأثير أملاح الفوضى (جوانيدين هيدروكلوريد، إيزوثيوسيانات جوانيدين، إلخ) والمجال المغناطيسي الخارجي، تم عزل الحمض النووي الريبي (DNA) والحمض النووي الريبي (RNA) من الدم والأنسجة الحيوانية والغذاء والكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض وعينات أخرى.