ዘዴዎች የፕሮቲን ማጽዳት:

ፕሮቲን የመንጻት, የመለየት እና የማጣራት ዘዴ, ፕሮቲን ከዋነኞቹ ሴሎች ወይም ቲሹዎች በተሟሟቀ ሁኔታ ውስጥ ይለቀቃል እና ባዮሎጂያዊ እንቅስቃሴን ሳይቀንስ በዋናው የተፈጥሮ ሁኔታ ውስጥ ይቆያል. በዚህ ምክንያት ቁሱ የእንስሳትን እና የአፕቲዝ ቲሹን ማስወገድ አለበት ፣የዘሩ ቁሳቁስ እንደ ታኒን ካሉ ንጥረ ነገሮች የዘር ሽፋንን መበከል እንኳን ማላቀቅ አለበት ፣ እና የዘይት ዘሩ በትንሹ የሚፈላ ኦርጋኒክ መሟሟትን መጠቀም ይመረጣል።

1. ፕሮቲን የመንጻት ዘዴ, መጠን እና የተለያዩ መለያየት ትንተና ዘዴዎች: ዳያሊሲስ እና ultrafiltration እነዚህ ፕሮቲኖች በከፊል-permeable ሽፋን ማለፍ የማይችሉትን ሞለኪውሎች ተፈጥሮ በኩል ማለፍ; density gradient centrifugation በመካከለኛው ውስጥ ያለው የፕሮቲን ጥራት እና መጠጋጋት በንጥረ ነገሮች ላይ የበለጠ ተጽእኖ ይኖረዋል። የፍጥነት አቀማመጥ ፈጣን ነው; ጄል ማጣሪያ የአምድ ክሮሞግራፊ ዓይነት ነው።

2. በአጠቃቀም ውስጥ የመሟሟት ልዩነት መለየት-የኤሌክትሮ-ዝናብ ምክንያቱም የፕሮቲን ሞለኪውሎች የተጣራ ክፍያ በዜሮ ኢኤሌክትሪክ ነጥብ ላይ ነው, በሞለኪውሎች መካከል ያለውን ኤሌክትሮስታቲክ መራቅን በመቀነስ, ለመሰብሰብ ቀላል እና ዝቅተኛ መሟሟት; ከጨው መፍትሄ ጋር ጥቅም ላይ የሚውል የጨው መፍትሄ ትኩረቱ የፕሮቲን ውህድነትን ይጨምራል ወይም ይቀንሳል.

3. ክፍያው ተለያይቷል እና በተለያዩ ዘዴዎች ይተነተናል, ዋናው ይዘቱ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና ion ልውውጥ ክሮሞግራፊን ያካትታል.

4. ዘዴዎችፕሮቲን ማጽዳትየፕሮቲኖች የተመረጠ ማስታወቂያ እና መለያየት ቅንጣት የማስተዋወቅ ጥንካሬን ይጠቀማሉ።

5. የ Affinity chromatography በሊንዶች መለያየት ላይ የተመሰረተ ነው. ይህ ባዮሎጂያዊ ባህሪ የፕሮቲን ሞለኪውሎች ሊንጋንድ ከሚባል ሌላ ሞለኪውል ጋር ከመቀላቀል ይልቅ እንዲቆራኙ ያስችላቸዋል።

6. ፕሮቲን የማጥራት ዘዴ፡- ዝቅተኛ የሙቀት መጠን ያለው ኦርጋኒክ ሟሟት የዝናብ ዘዴ፡- የአብዛኞቹን ፕሮቲኖች የመሟሟት እና የዝናብ መጠንን ለመቀነስ እንደ ሜታኖል፣ ኢታኖል ያሉ ከውሃ ጋር የማይጣጣሙ ኦርጋኒክ ፈሳሾችን ይጠቀሙ። ይህ ዘዴ ከጨው መውጣት ከፍተኛ ጥራት ያለው ነው, ነገር ግን ፕሮቲን የበለጠ ይጎዳል ቀላል ሲሆን, በዝቅተኛ የሙቀት መጠን መደረግ አለበት.

እንዴት ማፅዳት እንደሚቻልፕሮቲን ማጽዳት:

ፕሮቲን እንዴት ማፅዳት እንደሚቻል ፣ ፕሮቲን ትልቅ ሞለኪውል ነው ፣ እና የተለያዩ ሞለኪውላዊ መጠኖች አልቡሚን ፣ ፕሮቲን እና ትናንሽ ሞለኪውሎች ቁሳቁሶችን ለመለየት አንዳንድ ቀላል ዘዴዎች እና እንዲሁም የፕሮቲን ድብልቅ ናቸው ። የተለያዩ ሞለኪውላዊ መጠን ያላቸውን ፕሮቲኖች ለመለየት ዋናዎቹ ዘዴዎች ዳያሊስስ ፣ አልትራፊልትሬሽን ፣ ጄል ማጣሪያ እና ሴንትሪፉጋል መለያየት ናቸው። በፕሮቲን መለያየት ዘዴዎች ውስጥ ዳያሊሲስ እና አልትራፋይልቴሽን በብዛት ጥቅም ላይ ይውላሉ። የሚለየው የዲያሊሲስ ድብልቅ ከፊል ፐርሚብል ሽፋን በተሰራ የዳያሊስስ ቦርሳ ውስጥ ይጣላል እና ከዚያም ለመለየት በዲያሊሲስ መፍትሄ ውስጥ ይጠመቃል። Ultrafiltration ውሃን እና ሌሎች ትናንሽ ሞለኪውሎችን የሴንትሪፉጋል ኃይልን ወይም ግፊትን በከፊል የሚያልፍ ሽፋን እና ፕሮቲኖችን በከፊል የሚያልፍ ሽፋን ውስጥ የማለፍ ሂደት ነው። እነዚህ ሁለት ዘዴዎች ከፕሮቲን-ተኮር ማክሮ ሞለኪውሎች እና ከኦርጋኒክ ጨው-ተኮር ጥቃቅን ሞለኪውሎች ሊለዩ ይችላሉ. ብዙውን ጊዜ በጨው ይለቀቃሉ, ከጨው መሟሟት ዘዴ ጋር በጥምረት ጥቅም ላይ ይውላሉ, ወይም ያልተለመዱ የጨው መፍትሄዎችን በመጠቀም እነዚህን ሁለት ዘዴዎች ከጨው በኋላ ለማስተዋወቅ ሊተዋወቁ ይችላሉ.

1. ፕሮቲንን በጨው ማውጣት ዘዴ እንዴት ማፅዳት እንደሚቻል፡ የጨው ማውጣት ዘዴ መሰረት የሆነው ፕሮቲን በዲዊት ጨው መፍትሄ ውስጥ ያለው ሟሟት በጨው ክምችት መጨመር ይጨምራል, ነገር ግን የጨው ክምችት ወደ የተወሰነ እሴት ሲጨምር, የውሃ እንቅስቃሴ ይጨምራል. መቀነስ፣ ይህ ደግሞ አንዳንድ ፕሮቲኖች በሞለኪውላዊው መዋቅር ወለል በኩል ክፍያዎችን እንዲያመነጩ ሊያደርግ ይችላል።

2. ኦርጋኒክ የማሟሟት ዝናብ ዘዴ: በኦርጋኒክ መሟሟት ውስጥ ፕሮቲን ያለውን solubility ለመቀነስ ሁለት ምክንያቶች አሉ: ድርቀት ጋር ፕሮቲን እንደ ጨው መፍትሄ እንዴት ማጥራት; በሁለተኛ ደረጃ, ከውሃ ይልቅ የኦርጋኒክ መሟሟት የዲኤሌክትሪክ ቋሚነት በፖላር ፈሳሾች ውስጥ ሊቀንስ ይችላል.

3. ፕሮቲን የሚያዘነብልብ ወኪል፡- ፕሮቲን እንደ ዝናባማ ወኪል የሚሰራው በአንድ ዓይነት ወይም የፕሮቲን ዝናብ ላይ ብቻ ነው፣ የተለመዱት ደግሞ አልካላይን፣ ፕሮቲን፣ ሌክቲን እና ሄቪ ብረቶች ናቸው።

4. ፖሊ polyethylene glycol precipitation: በውሃ ውስጥ የሚሟሟ አዮኒክ ያልሆኑ ፖሊመሮችን እንዴት ማፅዳት እንደሚቻልፕሮቲን ማጽዳትእንደ ፖሊ polyethylene glycol እና ሶዲየም ዴክስትራን ሰልፌት ፕሮቲኖችን ለማፍሰስ።