Die skeiding en suiwering van proteïene word wyd gebruik in biochemiese navorsing en toepassing en is 'n belangrike operasionele vaardigheid. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument het die ru-skeiding en fyn skeiding inhoud vanproteïensuiwering vir almal. 'n Tipiese eukariotiese sel kan duisende verskillende proteïene bevat, sommige is baie ryk en sommige bevat slegs 'n paar kopieë. Om 'n sekere proteïen te bestudeer, is dit nodig om eers die proteïen van ander proteïene en nie-proteïenmolekules te suiwer.

Growwe skeiding

Wanneer die proteïenekstrak (soms gemeng met nukleïensure, polisakkariede, ens.) verkry word, word 'n stel toepaslike metodes gekies om die verlangde te skeiproteïenvan ander onsuiwerhede. Oor die algemeen gebruik hierdie stap van skeiding metodes soos uitsouting, iso-elektriese puntakkumulasie en organiese oplosmiddelfraksionering. Hierdie metodes word gekenmerk deur eenvoud en groot verwerkingskapasiteit, wat baie onsuiwerhede kan verwyder en die proteïenoplossing kan konsentreer. Sommige proteïenekstrakte is groot in volume en is nie geskik vir konsentrasie deur ophoping of uitsouting nie. U kan ultrafiltrasie, gelfiltrasie, vriesvakuumdroging of ander metodes vir konsentrasie kies.

Fyn skeiding

Na die growwe fraksionering van die monster is die volume oor die algemeen klein, en die meeste van die onsuiwerhede is verwyder. Vir verdere suiwering sluit chromatografiemetodes gewoonlik gelfiltrasie, ioonuitruilchromatografie, adsorpsie-chromatografie en affiniteitschromatografie in. Indien nodig, kan jy ook elektroforese, insluitend sone-elektroforese, iso-elektriese puntstel, ens. as die finale suiweringsproses kies. Die metode wat gebruik word vir onderverdelingsvlakskeiding is oor die algemeen klein in beplanning, maar met hoë resolusie.

Kristallisasie is die finale proses van proteïenskeiding en suiwering. Alhoewel die kristallisasieproses nie verseker dat die proteïen uniform moet wees nie, is dit slegs wanneer 'n sekere proteïen 'n voordeel in die oplossing het om 'n kristal te vorm. Die kristallisasieproses self gaan gepaard met 'n sekere mate van suiwering, en herkristallisasie kan 'n klein hoeveelheid vervalste proteïen verwyder. Sedert gedenatureerproteïennog nooit tydens die kristallisasieproses gevind is nie, is proteïenkristallisasie nie net 'n teken van suiwerheid nie, maar ook 'n kragtige riglyn om te bepaal dat die produk in sy natuurlike toestand is.