Nukleïensuur word in deoksiribonukleïensuur (DNA) en ribonukleïensuur (RNA) verdeel, waaronder RNA verdeel kan word in ribosomale RNA (rRNA), boodskapper-RNA (mRNA) en oordrag-RNA (tRNA) volgens verskillende funksies.

DNA is hoofsaaklik in die kern, mitochondria en chloroplaste gekonsentreer, terwyl RNA hoofsaaklik in die sitoplasma versprei word.

Omdat purienbasisse en pirimidienbasisse gekonjugeerde dubbelbindings in nukleïensure het, het nukleïensure die kenmerke van ultravioletabsorpsie. Die ultravioletabsorpsie van DNA-natriumsoute is ongeveer 260nm, en die absorpsie daarvan word uitgedruk as A260, en dit is by die absorpsietrog by 230nm, dus kan ultravioletspektroskopie gebruik word. Nukleïensure word kwantitatief en kwalitatief deur 'n luminometer bepaal.

Nukleïensure is amfoliete, wat gelykstaande is aan polisure. Nukleïensure kan in anione gedissosieer word deur neutrale of alkaliese buffers te gebruik, en in 'n elektriese veld geplaas word om na die anode te beweeg. Dit is die beginsel van elektroforese.

Nukleïensuur onttrekking en suiwering beginsels en vereistes

1. Verseker die integriteit van nukleïensuur primêre struktuur

2. Elimineer die kontaminasie van ander molekules (soos om RNA-interferensie uit te sluit wanneer DNA onttrek word)

3. Daar moet geen organiese oplosmiddels en hoë konsentrasies metaalione wees wat ensieme in nukleïensuurmonsters inhibeer nie

4. Verminder makromolekulêre stowwe soos proteïene, polisakkariede en lipiede soveel as moontlik

Nukleïensuur ekstraksie en suiwering metode

1. Fenol/chloroform ekstraksie metode

Dit is uitgevind in 1956. Nadat die sel gebreekte vloeistof of weefselhomogenaat met fenol/chloroform behandel is, word die nukleïensuurkomponente, hoofsaaklik DNA, in die waterfase opgelos, lipiede is hoofsaaklik in die organiese fase, en proteïene is tussen die twee geleë. fases.

2. Alkoholneerslag

Etanol kan die hidrasielaag van nukleïensuur uitskakel en die negatief gelaaide fosfaatgroep blootstel, en positief gelaaide ione soos NA﹢ kan met die fosfaatgroep kombineer om 'n neerslag te vorm.

3. Chromatografiese kolommetode

Deur die spesiale silika-gebaseerde adsorpsiemateriaal kan DNA spesifiek geadsorbeer word, terwyl RNA en proteïen glad kan deurgaan, en dan hoë sout en lae pH gebruik om nukleïensuur te bind, en elueer met lae sout en hoë pH om nukleïen te skei en te suiwer suur.

4. Termiese kraak alkali metode

Alkaliese ekstraksie gebruik hoofsaaklik die topologiese verskille tussen kovalent geslote sirkelvormige plasmiede en lineêre chromatien om hulle te skei. Onder alkaliese toestande is gedenatureerde proteïene oplosbaar.

5. Kookpirolise metode

Die DNS-oplossing word hittebehandel om voordeel te trek uit die eienskappe van lineêre DNS-molekules om DNS-fragmente te skei van die neerslag wat gevorm word deur gedenatureerde proteïene en sellulêre puin deur sentrifugering.

6. Nanomagnetiese krale metode

Deur nanotegnologie te gebruik om die oppervlak van superparamagnetiese nanopartikels te verbeter en te verander, word superparamagnetiese silikonoksied nanomagnetiese krale voorberei. Die magnetiese krale kan spesifiek herken en doeltreffend aan nukleïensuurmolekules op 'n mikroskopiese koppelvlak bind. Met behulp van die superparamagnetiese eienskappe van silika-nanosfere, onder die werking van Chaotropiese soute (guanidienhidrochloried, guanidien-isotiosianaat, ens.) en 'n eksterne magnetiese veld, is DNA en RNA uit bloed, diereweefsel, voedsel, patogeniese mikroörganismes en ander monsters geïsoleer.